آشنایی با تکنیک های ISSR-PCR و Vectorette PCR

؛PCR تکنیکی است که به طور گسترده در زیست شناسی مولکولی استفاده می شود. از PCR برای تکثیر قطعات DNA در محیط آزمایشگاهی استفاده میگردد. در طی سالهای اخیر تکنیک های مختلف PCR ابداع شده اند که بسته به هدف، پژوهشگران ممکن از یک یا چندین تکنیک مختلف آن برای آزمایشات خو استفاده نمایند. ISSR-PCR تکنیکی است که از آن برای تکثیر قطعه ای از DNA که توالی پرایمری دو انتهای آن نامشخص است، اما وجود این قطعه بین دو ناحیه ی SSR شناخته شده مورد استفاده قرار می گیرد. ISSR-PCR تکنیکی است که از میکروستلایت ها به عنوان مارکر استفاده میکند. این تکنیک، روش سریع و ارزان بوده و دارای کاربردهای زیادی می باشد که از جمله ی آنها می توان بهمطالعه ی تنوعات ژنتیکی و نیز کاربرد آن در پزشکی قانونی اشاره کرد. Vectorette PCR نیز تکنیکی است که از آن برای تکثیر قطعاتی از DNA که توالی پرایمری یک طرف آن مشخص، ولی توالی پرایمری طرف دیگر نامعلوم است استفاده می شود. در این تکنیک از قطعات اولیگونوکلئوتیدی سنتزی استفاده می شود که این قطعات vectorette نامیده می شوند. در vectorette PCR از دو پرایمر برای انجام واکنش PCR استفاده می شود که یکی پرایمر اختصاصی و دیگری vectorette primer نامیده می شود. این تکنیک از ٣ مرحله تشکیل شده است که عبارتاند از ١- برش DNA با استفاده از آنزیمهای برشگر محدودالاثر مناسب -2- اتصال قطعات بریده شده به vectorette ها و 3- انجام PCR با استفاده از پرایمر اختصاصی و vectorette primer.

کلیدواژه ها:

میکروستلایت ، ISSR-PCR ، SSR ، Vectorette PCR