بیان پروتئین پوششی ویروس PVX در باکتری به منظور تولید آنتی بادی اختصاصی ویروس
سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 678
فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI08_0188
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
چکیده مقاله:
تشخیص ویروسها با استفاده از آنتیبادیهای اختصاصی اهمیت ویژه ای برای کنترل بیماریهای گیاهی خصوصا در برنامه تولید بذر سیب زمینی دارد. یکی از مهم ترین ویروسهای سیب زمینی (PVX) Potato X Potexvirus با گسترده جهانی میباشد. در این تحقیق به منظور تولید آنتیبادی اختصاصی PVX ژن (CP) Coat protein آن بصورت نوترکیب تولید گردید. ابتدا، واکنش RT - PCRبا استفاده از آغازگرهای اختصاصی حاوی سایت برشی برای تکثیر CP انجام گرفت. الکتروفورز محصول PCR بر روی ژل آگارز، قطعه تکثیر شده به طول 714BP را تایید کرد. ژن CP و پلاسمید pGEX2TK توسط آنزیمهای BamHI و ecoRI برش داده شدند و پس از خالص سازی لیگاسیون بین آنها صورت گرفت. پلاسمید نوترکیب pGEX2TK-CP به توان PVX با الکتروپوراسیون به باکتری E.coli منتقل و در آن تکثیر گردید. پس از گزینش باکتریهای حاوی پلاسمید نوترکیب به کمک PCR و استخراج پلاسمید از آنها، توالییابی درست بودن کلون ایجاد شده را تایید کرد. در ادامه پلاسمید نوترکیب به سویه RRosetta باکتری E.coli منتقل و کشت گردید. با اضافه کردن IPTG در محیط کشت باکتری تولید پروتئین CP از روی پلاسمید انجام و پروتئین های باکتری استخراج شد. الکتروفورز پروتئین ، بیان شدن CP را نشان داد. این پروتئین پس از خالص سازی جهت تولید آنتیبادی اختصاصی PVX مورد استفاده قرار میگیرد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
لیلا پورهنگ
دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی
مقصود پژوهنده
عضو هیئت علمی گروه بیوتکنولوژی
اکبر شیرزاد
عضو هیئت علمی گروه گیاهپزشکی
محسن درزی رامندی
دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، کیلومتر ۳۵ جاده تبریز - مراغه
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :