روش بهینه سازی شده برای استخراج DNA از نمونه های گیاهی برگ تازه و هربار یومی براساس دستورالعمل تامسون و مورای

گاهی استخراج DNA از بافت های گیاهی با سختی روبرو می شود. معمولاً DNA استخراج شده، کم و یا بی کیفیت و به رنگ قهوه ای می باشد و انجام PCR با آن منجر به تولید باند نمی ود. استفاده از کیت های استخراج شرکت های مختلف نیز گاهی کارائی لازم را نداشته و مقدار DNA و کیفیت های مختلفی از آن را می دهد. و امکان دارد آزمون کردن این DNA روی ژل برای بررسی کیفیت و کمیت آن، باند تولید می کند، اما قابل PCR کردن نیست. ما پس از آزمایش های مختلف، دستورالعمل استخراج تامسون و مورای را بهینه سازی کردیم و در نهایت توانستیم از نمونه های برگچه تازه، برگ بالغ و نمونه های خشک هربار بومی گیاه پنبه، DNA با کیفیت و کمیت مطلوب استخراج کنیم. آزمن نمونه های DNA استخراج شده با دو دستورالعمل تاموسون- مورای و بهینه سازی ده با 2 روش PCR با پرایمر یونیرسال و تعیین غلظت DNA با اسپکتوفتومتری و همچنین بررسی کیفیت رنگ نمونه انجام شد. PCR نمونه DNA استخراج شده از گیاه پنبه به روش بهینه سازی شده با پرایمر یونیورسال OPI-12 موفقی آمیز بود و باندهای واضح تولید کرد. همچنین این DNA بی رنگ و شفاف و با غلظت مناسب بود. اما DNA استخراج شده به روش مورای و تامسون قهوه ای رنگ، غیرقابل PCR و با غلظت کم تر از روش بهینه سازی شده بود.

کلیدواژه ها:

استخراج DNA از گیاهان ، دستورالعمل تامسون و مورای ، PCR با پرایمر یونورسال ، اسپکتوفتومتری