بهینه سازی و مقایس هی روش های شیمیایی انتقال ژن با الکتروپوراسیون در رده های سلولی یوکاریوتی Vero و Huh-7
محل انتشار: هفتمین همایش بیوتکنولوژی جمهوری اسلامی ایران
سال انتشار: 1390
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 916
فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI07_0703
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
چکیده مقاله:
انتقال ژن به سلولهای یوکاریوتی ضروریترین گام در راستای فهم عملکرد ژنها و محصولات ژنی همچنین پیشرفت در زمینه ی ژن درمانی محسوب می شود. در این مطالعه انتقال ژن به دو رده ی سلولی یوکاریوتی Vero و Huh- 7 از دو روش شیمیایی - از طریق بکارگیری دو ترکیب تجاری انتقال ژن - و فیزیکی با استفاده از الکتروپوراسیون بهینه و مقایسه شد. بهینه کردن انتقال ژن در روش شیمیایی با بکارگیری دانسیته های سلولی مختلف و نسبتهای مختلف ریبونوکلئیک اسید به ترکیب شیمیایی در هر دو رد ه ی سلولی انجام شد. همچنین به منظور بهینه سازی روش انتقال فیزیکی الکتروپوراسیون پارامترهای قدرت میدان الکتریکی و مدت زمان مجاورت سلولها با پالس الکتریکی بهینه شد. وکتور pEGFP-N1 به سلولها در شرایط متفاوت منتقل شد و بیان پروتئین فلوئورسانس سبز GFP با کمک فلوسایتومتر و میکروسکوپ فلوئورسانس سنجیده شد. در سلولهای Huh-7 بالاترین درصد انتقال ژن به کمک الکتروپوراسیون 63.74٪ با استفاده از 12.2% Lipofectarnine TM 2000 و با بکارگیری jetPEITM-HUVE 14.2% بدست آمد درحالیکه در رده ی سلولی Vero بالاترین درصد بدست آمده در انتقال ژن بکمک الکتروپوراسیون 73.9٪ و درصورت بکارگیری jetPEITM-HUVE 28٪ بود. همچنین افزودن DMSO به بافر الکتروپوراسیون بر میزان زنده بودن سلولها و درصد انتقال ژن در سلولهای Huh-7 بی تأثیر بود. با توجه به نتایج بدست آمده می توان از روش ساده و مقرون به صرف هی الکتروپوراسیون در انتقال ژن به دو رده ی سلولی یوکاریوتی Vero و Huh-7 استفاده کرد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
عطیه هاشمی
تهران، انستیتو پاستور ایران. بخش هپاتیت وایدز
فرزین روحوند
تهران، انستیتو پاستور ایران، بانک ژن توترکیب ایران
محمدحسین قهرمانی
تهران، دانشگاه تهران، دانشکده ی داروسازی
محمدرضا آقا صادقی
تهران، انستیتو پاستور ایران. بخش هپاتیت وایدز
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :