ارزیابی قابلیت اتصال انتهای آمینوی متالوتیونین برنج OsMTI-1b به کادمیوم از طریق حذف انتهای کربوکسی

متالوتیونینهاMT گروهی از پروتئینهای غنی از آمینواسیدهای سیستئین و با وزن مولکولی کم ( 5 تا 10 کیلودالتون) هستندکه میتوانند از طریق گروه تیول آمینواسیدهای سیستئن به فلزات متصل شوند. بیشتر مطالعات بر رویMTها در گیاهان به بررسی بیان این ژنها در بافتهای مختلف محدود شده است و تحقیقات اندکی تاکنون بر روی نقش و ساختارMTها صورت گرفته است. تحقیق حاضر با هدف حذف انتهای کربوکسی از ایزوفرمOsMTI-1bمتعلق به تیپ یکMTبرنج و تولید فرم موتاسیون یافتهN-OsMTI-1bو بررسی نقش آن در ایجاد تحمل به تنش فلز کادمیوم در مقایسه با فرم طبیعی آنOsMTI-1b انجام شد. به منظور تولید قطعه ژنیN-OsMTI-1b از ژن OsMTI-1bپرایمراختصاصی طراحی و ژن مورد نظر توسطPCRتکثیر و در ناقل بیانیpET41aهمسانه سازی گردید. پس از تائید صحت همسانهسازی با استفاده از توالی یابی، دستواره تولید شده به میزبان بیانی E. coliسویهیRosetta(DE3 منتقل شد. بیان هترولوگ N-OsMTI-1b مورد تایید قرار گرفت و پروتئین مورد نظر خالص سازی شد. با قرار دادن پروتئینهایN- و OsMTI-1bOsMTI-1bدرمعرض کادمیوم و معرف المن با پروتئینهای انکوبه شده قابلیت جذب با کادمیوم در شرایط این ویترو برای دو پروتئین N-OsMTI-1b و OsMTI-1bبررسی شد. به نظر می رسد ناحیه انتهای آمینو در این پروتئین به طور مستقل از ناحیه انتهای کربوکسی نیزقابلیت اتصال به کادمیوم را دارد

کلیدواژه ها:

برنج ، متالوتیونین ، انتهای آمینو ، بیان پروتئین ، معرف المن