طراحی بیوسنسورDNAنانوذرات طلا بر پایه شناسایی ژنMultiple Insertion Elementبمنظور تشخیص تفریقی گونه های بروسلا

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 452

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0758

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

بروسلوز یک بیماری مشترک جهانی است که توسط باکتری های درون سلولی لختیاری از جنس بروسلا ایجاد می شود. گونه های شناسایی شده بروسلا دارای شباهت ژنتیکی و ایمنوژنیک بالایی هستند. روش متداول شناسایی و تفریق جنس های بروسلا غالبا زمانبر، نیازمند ک اربر ماهر وتجهیزات گرانقیمت بوده و با خطر بالای اکتساب عفونت آزمایشگاهی همراه می باشند. روشهای متداول اختصاصی و مبتنی برPCRمانندPCRزمان حقیقی که امکان تشخیص تفریقی جنسها را فراهم می آورد نیازمند تجهیزات گران قیمت و روشهای پیچیده آنالیز هستند. در مطالعه حاضر یک بیوسنسور حساس، اختصاصی و سریع بر پایه شناسایی لوکوس ژنیMIEبا استفاده از تجمعات القایی با نانو ذرات طلا بمنظور شناسایی 4 گونه اصلی جنس بروسلا شاملB.suis و B. canis ،B.abortus ،B. Melitensisطراحی گردید. پروب های اولیگونوکلئوتیدی اختصاصی گونهbp30 ) مکمل بخشی از ژنMIEدارای کلاهک تیول در دو انتهای ' 3 و ' 5 به نانوذرات طلا با قطر 20 الحاق شدند. نمونه هایDNAپس از انجامPCRو نیز نمونه هایDNAتام خالص سازی شده از باکتری های مورد مطالعه و برش داده شده با آنزیمEcoRIپس از مجاورت با پروب طراحی شده از نظر تغییر رنگ از قرمز به آبی مورد ارزیابی قرار گرفتند حداقل غلظت قابل شناساییDNAبا استفاده از94/8μg/ml PCR بود در حالیکه حد اقل غلظت قابل شناسا یی با استفاده از پروب نانوذراتμg/ml21/8بود. تفریق گونه های مختلف بر پایه واکنش پروب با ژنMIEپس از هضمDNAژنومی با انزیمEcoRIبا حداقل غلظتμg/ml99/5امکانپذیر بود. 4 گونه جنس بروسلا با استفاده از نانوپروب طراحی شده به صورت اختصاصی و چند واکنشی قابل تفریق بودند. حساسیت روشطراحی شده96/2%و اختصاصیت آن97/9%بدست آمد.

نویسندگان

روزبه اکبری

دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز

محمدرضا تابند

استادیار بخش بیوشیمی و بیولوژی مولکولی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز

نسیم علی نژادراهدار

دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه شهید چمران اهواز