بیان ژن کیتیناز کایمر 42 ( کیتیناز 42 + دمین متصل شونده به کیتین) درباکتری اشرشیاکلی

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 927

متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0660

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

آنزیم کیتیناز 42 بر روی دیواره قارچهای پاتوژن گیاهی اثر تخریبکنندگی داشته و باعث هیدرولیز پیوندهای گلیکوزیدی میگردد. بررسی هایی که تاکنون در جهت بهبود عملکرد این آنزیم انجام گرفته، نشان میدهند که افزودن دمین متصل شونده به کیتین اثرافزایندهای برفعالیت این آنزیم درمیزبان قارچی، داشته است. در این تحقیق همسانهسازی ژن کایمر 42 که حاوی ژن کیتیناز 42 متعلق به گونهTrichoderma atrovirideدمین متصلشونده به کیتین در انتهای آمینی آن متعلق به 18.10T. atrovirideانجام و بیان پروکاریوتی آن مورد مطالعه قرار گرفت. در نهایت فعالیت این آنزیم با آنزیم کیتیناز 42 مقایسه گردید. بدین منظور ابتدا ژن کایمر 42 توسط آغازگرهای اختصاصی ژن تکثیر و در ناقلpJETهمسانهسازی شد. سپس این ژن به روش هضم آنزیمی از این ناقل جدا شده ودر ناقل بیانی pET26.b(+)همسانهسازی گردید. برای تأیید این سازه ازPCRالگوی هضم آنزیمی و در نهایت توالییابی استفاده شد که در هر سه روش حضور ژن کایمر 42 به طول 1402 جفتباز تأیید شد. سپس این سازه به میزبانE. coli BL21-DE3 منتقل شده و بیان گردید. برای تایید بیان این آنزیم از تکنیکSDS_PAGEاستفاده شد. همچنین برای تایید فعالیت آنزیم از روش رنگ سنجی استفاده شد که در این روش فعالیت این آنزیم در حضور کیتین کلوئیدی و در طولموج 544 نانومتر اندازهگیری شد. نتایج حاصل نشان داد که فعالیت آنزیم کیتیناز کایمر 42 نسبت به کیتیناز 42 بیشتر است.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

عطیه عطائی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران

مصطفی مطلبی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران

محمدرضا زمانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران

محبوبه ضیائی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Yasuyuki, A ra kane..Qingsong Zhu., Masahiro M ats _ mi ...
  • .Iseli, B., Boller, T., Neuhaus, J.M. (1993). "The N-terminal cysteine-rich ...
  • Kowsari, M., Motallebi, M., Zamani, . (2013). "Protein Engineering of ...
  • Limon, M.C..Chacon, M.R., Mejias, R..Delgado Jarana, J., Rincon, AM., Codon, ...
  • Matroodi, S., Motallebi, M., Zamani, M., Moradyar, M. (2013). "Designing ...
  • Ulhoa, C.J..Peberdy, J.F.(1 992).Purification and some properties of the extrace]lular ...
  • Van Loon, L. (1985). n _ Patho genesis-related proteins." _ ...
  • Yanai, K., Takaya, N., Kojima, N.Horiuchi, H., Ohta, A., Takagi, ...
  • نمایش کامل مراجع