همسانهسازی و بیان پروکاریوتی ژنchit42 حاوی ChBD در انتهای کربوکسیلی

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 675

فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_0625

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

آنزیمهای کیتیناز با هیدرولیز اتصالاتN-acetylglucoseamineدر پلیمر تشکیلدهنده زنجیرههای کیتین موجود در دیواره سلولی قارچ های پاتوژن، به مبارزه با این عوامل بیماریزا میپردازند. قارچ ریکودرما، بهدلیل ترشح انواعی از آنزیمهای کیتینازی، بهعنوان عاملی قوی درکنترل بیولوژیک بیماریهای قارچی مورد استفاده قرار میگیرد. این تحقیق بهمنظور بررسی اثرات ضدقارچی آنزیم کیتیناز 42 با منشأقارچTrichoderma atrovirideحاویChBDبا منشأRhizopusدر انتهای کربوکسیلی آن، انجام گرفته است. بدین منظور ابتدا این ژن با آغازگرهای اختصاصی حاوی جایگاههای آنزیمی متناسب برای همسانهسازی در ناقل بیانیpET26b(+) تکثیر شد. سپس در ناقل pJETهمسانهسازی گردید. در ادامه به روش هضم آنزیمی از این ناقل جدا گردیده و در ناقل بیانیpET26b(+) همسانهسازی شد.سازه بهدست آمده، توسط الگویPCRهضم آنزیمی و تعیین توالی مورد تأیید قرار گرفت که در هر سه روش حضور ژن کایمرکیتیناز42 به طول 1431 جفتباز تأیید شد. در ادامه این سازه به میزبانBL21-DE3 منتقل شده و شرایط بیانی در این میزبان پروکاریوتی بهینه سازی گردید. آنزیم کایمر در شرایط بهینه تولید شده و آماده ارزیابی علیه قارچهای بیماریزا می باشد.

نویسندگان

نرگس اردستانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مصطفی مطلبی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محمدرضا زمانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

زهرا مقدسی جهرمی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Carsolio, C., Benhamou, N. Haran, _ C., GutiACrrez, A., Chet, ...
  • Elad _ Chet I., Henis Y. (1982). Degradation of plant ...
  • EI-Katatny M. H., W. Somitsch, K. H. Robra, M. S. ...
  • - Haran S., Shickler H, Chet I. (1996). Molecular mechanisms ...
  • Harighi, M. J., M. Motallebi, et al. (2006). "Antifungal activity ...
  • Iseli, B., Boller, T. and Neuhaus, J. M. (1993). The ...
  • _ eubner-Metzge. G., and Meins F, Jr. (1999).Functions and regulation ...
  • Lorito M., Harman C. K. , Di Pietro A., Woo ...
  • Limon, _ Margolles- Clarck. E., Benitez, T., and Penttila, M. ...
  • McCormac, A.C, Fowler, M.R., Chen, D.F., and Elliott, M.C. (2001). ...
  • Morav» A-kovA;, ., MatuA:ه-kovA;, _ J., Bauer, M., and MlynA:roA:, ...
  • Kowsari, M., M. Motallebi, et al. (2013). "Protein Engineering of ...
  • Yanai, K., Takaya, N., Kojima, _ Horiuchi, H., Ohta, A., ...
  • نمایش کامل مراجع