تعیین پلی مورفیسم ژن کاپاکازئین (κ-CSN) در جمعیت شترهای استان گلستان با استفاده از تکنیک PCR-RFLP

کاپاکازئین یکی از اجزای مهم پروتئینی از خانواده پروتئین های کازئینی در شیر که نقش مهمی را در ثبات میسل ها به عهده داشته که در راندمان تبدیل شیر به پنیر دارای اهمیت ویژه ای در صنعت پنیر سازی است. هدف از این تحقیق بررسی رفتار ژن کاپا کازئین (κ-CSN) در جمعیت شترهای استان گلستان بوده است. برای این منظور از 100 نفر شتر از شهرهای آق قلا، گنبد و بندرترکمن نمونه گیری خون به عمل آمد. استخراج DNA از هر یک از نمونه های خون با استفاده از روش بهینه یافته نمکی انجام گرفت. پس از مرحله استخراج ، DNA با استفاده از یک جفت آغازگر قطعه 488bp از جفت باز 137-تا جفت باز 351 از طرفین انتهای 5 ژن کاپازئین با استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) تکثیر گردید. جهت تعیین ژنوتیپ، محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز توسط آنزیم ALU1 مورد هضم قرار گرفته و قطعات DNA حاصله با استفاده از ژل آگارز 3/5% الکتروفورز و جداسازی شدند. نتایج حاصل از باندهای الکتروفورزی سه ژنوتیپ AB، AA و BB به ترتیب با فراوانی 0/18، 0/27 و 0/55 بود. نتایج بدست آمده از این تحقیق نشان می دهد که ژن کاپاکازئین همانند آنچه در گاو وجود دارد پلی مورف می باشد. میزان هتروزایگوسیتی مشاهده شده در جمعیت مورد بررسی 27% بود که نشاندهنده تنوع ژنتیکی نسبتا کم در این جمعیت برای این ژن می باشد. میزان هتروزایگوسیتی مورد انتظار در این جمعیت 43/37% محاسبه شد. همچنین میزان کل X^2 محاسبه شده برابر با 14/43 بود که در سطح احتمال 0/01 دارای تفاوت معنی داری است بنابراین جمعیت در تعادل هاردی-واینبرگ نمی باشد.

کلیدواژه ها:

پلی مورفیسم ، ژن ، شتر ، کاپا-کازئین ، PCR- RFLP