کالیبراسیون دستگاه ترموسایکلر جهت بررسی تنوع ژنتیکی گیاه مامیران (Chelidonium majus)با استفاده ار مارکر مولکولی ISSR

سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 577

فایل این مقاله در 6 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NACONF01_0977

تاریخ نمایه سازی: 25 خرداد 1393

چکیده مقاله:

امروزه از نشانگرهای مولکولی در سطح وسیعی استفاده میشود. این تکنیک ها عمدتاً برای نقشه یابی ژنی، تشخیص ژنوتیپ های مطلوب، مطالعات تکوینی و فیلوژنتیک در گیاهان بکار برده می شوند. در این راستا پس از استخراج DNA از گیاه، نیازمند یک روش مناسب جهت تکثیر توالی قطعات DNA می باشد. چندشکلی تکثیر اختصاصی DNA (ISSR) یک روش ساده و قابل اعتماد برای تشخیص پلی مورفیسم DNA است و بطور گسترده ای در مطالعات تنوع ژنتیکی با استفاده از آغازگرهای بلند بکار گرفته میشود. در پژوهش حاضر که برای اولین بار در ایران صورت پذیرفت، واکنش ISSR و شرایط بهینه سازی چرخه دمایی برای تولید قطعات تکثیر ISSR از گیاه مامیران (Chelidonium majus) مورد بررسی قرار گرفت. برای تعیین شرایط بهینه، غلظت های مختلف MgCl2،DNA الگو، آنزیم Taq پلیمراز،پرایمر،dNTPs و همچنین برنامه های مختلف چرخه دمایی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. با توجه به نتایج حاصله بهترین الگوهای باندی تجدیدپذیر با استفاده از 94/. میکرولیتر از پرایمر،MgCl2 به مقدار 7/. میکرولیتر،2 میکرولیتر از DNA الگو،37/. میکرولیتر dNTPs و 2/. میکرولیتر Taq پلیمراز، که به حجم 12/5 میکرولیتر می رسانده شده بودند بدست آمد. از 5 آغازگر استفاده شده، 3 آغازگر ISSR-8،و ISSR-14 و ISSR-2 پلیمورفیسم را به صورت باندهای واضح نشان دادند. در نهایت با توجه به نتایج حاصل، واکنش ISSR -PCR بهینه سازی شده را میتوان در تجزیه و تحلیل تنوع ژنتیکی گیاه مامیران مورد استفاده قرار داد.

نویسندگان

رجا قلی نژاد بربری

دانشجوی کارشناسی ارشد زیست گیاهی دانشگاه پیام نور ساری

سید کمال کاظمی تبار

دانشیار دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی ساری

عباس قلی پور

استادیار دانشگاه پیام نور ساری

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :