شناسایی Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map) با استفاده از مارکرهای ژنتیکیF۵۷, IS۱۳۱۱, HspX, Map۰۲, ISMav۲, Locus ۲۵۵ ،مکملی بر مارکر شناخته شده IS۹۰۰.

مقدمه مایکوباکتریوم ایویوم زیرگونه پاراتوبرکولوزیس Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis (Map)عامل ایجاد بیماری یون (پارتوبرکولوزیس) در نشخوارکنندگان می باشد. این باکتری دارای کند ترین سرعت رشد در میان مایکوباکتریوم های قابل رشد و کشت نمونه های مشکوک به آن ۱۲ هفته و یا حتی بیشتر پیش از آنکه پرگنه مشهودی ایجاد نماید، بطول می انجامد. در حال حاضر IS۹۰۰ شناخته شده ترین مارکر ژنتیکی در پروتکل های تشخیصی Map با پایه PCR می باشد. بواسطه شناسایی عناصر ژنتیکی شبیه IS۹۰۰ در ژنوم مایکوباکتریوم های دیگر، اختصاصیت این مارکر زیر سوال قرار گرفته استهدف در مطالعه حاضر کاربرد این مارکر همراه با شش مارکر دیگر اختصاصی شامل F۵۷, IS۱۳۱۱, HspX, Map۰۲, ISMav۲ and Locus ۲۵۵ شرح داده شده است.روش کار واکنش های PCR بصورت انفرادی و به روش متعارف اجرا گردیدند. تمهیدات لازم برای بهینه سازی شرایط دما و اجزاء واکنش به نحوی انجام پذیرفت که واکنش های همه مارکرها توسط یک پروتکل قابل اجرا باشند. این رویه بر روی ۳۰ جدایه بومی Map جمع آوری شده از گاو (۲۴ مورد)، بز (۲ مورد) و گوسفند ( ۴ مورد) در استان های اصفهان، البرز، تهران، زنجان، فارس و قزوین اجرا گردید.یافته ها اجرای این روش در تمام واکنش های PCR بر روی همه جدایه ها و همچنین سویه آزمایشگاهی Map ۳۱۶f با موفقیت همراه بود و محصولات مورد انتظار در تکثیر بطول ۵۶۰ ، ۷۰۴، ۶۰۸، ۲۱۱، ۲۷۸ ، ۵۰۷ و ۴۰۴ زوج باز بترتیب در مورد مارکرهای IS۹۰۰، F۵۷، IS۱۳۱۱، HspX، Map۰۲، ISMav۲ و Locus ۲۵۵ تولید شدند.نتیجه گیری در شرایط ایران که مارکر ژنتیکی IS۹۰۰ همچنان به عنوان ستون فقرات در روش های مولکولی تشخیص Map بکار گرفته می شود، استفاده همزمان آن با هر یک از شش مارکر ژنتیکی شرح داده شده در این مطالعه به توانایی آزمایشگاه در تشخیص صحیح Map خواهد افزود.

کلیدواژه ها:

Map ، PCR ، amplification