توسعه تکنیک RT-LAMP جهت ردیابی حساس و دقیق ویروس موزائیک رگهای گندم

ویروس موزائیک رگهای گندم از گسترده ترین و شایعترین ویروسهای عامل بیماری موزائیک در گندم در سراسر جهان و از جمله ایران بوده و در صورت وقوع آلودگی زودهنگام پائیزه، میزان خسارت تا 100% محصول گزارش شده است. این ویروس از جنس تریتیموویروس و خانواده پوتیویریده و با ژنوم آر.ان.ای تک رشته ای مثبت می باشد. ردیابی دقیق و سریع آلودگی به این ویروس، در برنامه های مدیریت کنترل آن از اهمیت زیادی برخوردار می باشد. روشهای تشخیص سرولوژیکی بکمک آنتی بادی های اختصاصی و نیز روشهای مولکولی متکی بر واکنش زنجیرهای پلیمراز جهت ردیابی این ویروس توسعه داده و بکار گرفته شده اند. در این روش ها، محدودیتهای ناشی از نیاز به وقت بیشتر و نیز وابستگی به ابزارها و دستگاههای حساس پیشرفته، از معایب تکنیکی محسوب می شوند. بر این اساس در این تحقیق روش آر.تی.لمپ که در دهه اخیر معرفی شده است، جهت ردیابی ویروس موزائیک رگهای در گندم توسعه داده شده دقت آن با آزمون معمول آر.تی.پی.سی.آر مورد مقایسه نسبی قرار گرفت. برای این منظور چهار آغازگر اختصاصی جهت بکارگیری در آزمون آر.تی.لمپ طراحی و مورد استفاده قرار گرفت. منتایج حاصل از آر.تی.پی.سی.آر نشان داد که از 26 نمون مورد بررسی، 14 نمونه آلوده به ویروس موزائیک رگهای گندم می باشند در حالیکه بکمک تکنیک آر.تی.لمپ علاوه بر 14 نمونه فوق، یک نمونه دیگر نیز به آلوده تشخیص داده شد. برابر این نتایج، دقت آزمون لمپ معادل و حتی تا حدودی بیشتر از آزمون آر.تی.پی.سی.آر معمول بوده و در ردیابی غلظتهای کم ویروس ویروس موزائیک رگهای گندم در بافتهای گیاهی از دقت بیشتری برخوردار است.

کلیدواژه ها:

ویروس موزائیک رگهای گندم ، آر.تی.لمپ