همسانه سازی ژن اینترفرون گامای انسانی در ناقل بیانی جهت بیان در ریز جلبک Dunaliella salina

اینترفرون گاما سیتوکین اصلی سیستم ایمنی است که نقش مهمی در پاسخ ایمنی دارد، با رونوشتهای ویروسی تداخل می کند و در تهییج آنیژن موجود در سطح سلولها، بیان مولکول MHC و بهبود بافت سلولی در زخمهای التهابی نقش دارد. اثرات ضد توموری اینترفرون گاما، آن را به یک فاکتور ضدسرطانی مناسب تبدیل کرده است. D.salina ریز جلبک سبز تک سلولی است که متحمل به شوری و بدون دیواره سلولی سخت است و پتانسیل تبدیل به یک میزبان مناسب برای تولید آنتی بادی، واکسن خ وراکی و پلی پپتیدهای باارزش را دارا می باشد. با توجه به اهمیت دارویی پروتئین ا ینترفرون گامای انسانی، در بررسی حاضر ژن اینترفرون گامای انسانی، با استفاده از آغازگرهای اختصاصی رفت و برگشت که شامل جایگاههای برشی مناسب، توالی His tag، جایگاه پروتئازی فاکتور Xa و توالی دوطرف ژن اینترفرون گامای انسانی تکثیر شد. پس از هضم ناقل بیانی pCAMBIA1305.1، با اسظتفاده از آنزیم های برشی، محصول PCR برش خورده در واکنش اتصال با ناقل برش خورده، قرار گرفت و در مرحله بعد محصول اتصال طی فرایند ترانسفورم اسیون به روش شک حرارتی به سلولهای مستعد اشرشیاکلی سویه DH5a، انتقال داده شد. در نهایت محصول همسانه سازی توسط Colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی تأئید گردید.

کلیدواژه ها:

اینترفرون گاما ، D. Salina ، pCAMBIA1305.1