همسانه سازی ژن زیر واحد بتا فیکوسیانین در ناقل بیانی

سی فیکوسیانین C-PC) C-Phycocyanin) جدا شده از سیانوباکترها دارای فعالیتهای دارویی گوناگونی از جمله ضد التهابی و ضد توموری است. با توجه به فعالیت ضدتوموری زیر واح بتافیکوسیانین، هدف از این مطالعه شناسایی، جداسازی و همسانه سازی ژن زیرواحد بتافیکوسیانین در ناقل بیانی بود تا امکان تولید آن به صورت پروتئین نوترکیب در باکتری E.coli فراهم گردد. بدین ترتیب استخراج ژنوم از سیانوباکتر Spirulina platensis جهت استفاده از PCR به عنوان الگو، انجام شد. ناقل بیان (+)pET43.1a و محصول تکثیر یافته با آغازگرهای اختصاصی، توسط آنزیمهای بری Ndel, Notl، برش داده شدند و عمل اتصال بوسیله آنزیم T4 DNA Ligase انجام شد و پس از عمل ترانسفورماسیون، باکتری اشرشیاکلی سویه( BL21(DE3 تراریخته بر روی محیط حاوی آنتی بیوتیک آمپیسیلین کشت داده شد. بررسی کلونیها با استفاده از تکنیک Colony PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی، حضور ژن زیرواحدبتا در ناقل بیانی (+)pET-43.1a را تأئید نمود.

کلیدواژه ها:

ژن زیرواحد بتا فیکوسیانین ، همسانه سازی ، اسپیرولینا ، (+)pET43.1a