بهینه سازی تراریختی موقت با روش اگرواینفیلتریشن در گیاه گندم

با توجه به اهمیت تولید گیاهان تراریخت بویژه غلات ارائه راهکارهای مناسب برای تراریختی آنها می تواند مؤثر واقع گردد. تکنیک های مؤثر انتقال ژن در تمامی غلات و گونه های مهم دیگر با مشکلاتی مواجه است. از آنجا که ایجاد لاین های تراریخت کار بسیار سخت، وقتگیر و هزینه بری است می توان با روش بیان گذرا کیفیت بیانی ناقل مورد نظر و سطح بیان راقبل از انجام این آزمایشات وقتگیر کنترل نمود و بعد از اطمینان از صحت وکتور و درست بودن پروتئین بیان شده، اقدام به تولید گیاه تراریخت نمود. تراریختی گندم بعنوان یکی از مهمترین گیاهان از اهمیت ویژه ای در جوامع برخوردار است. بنابراین بهینه سازی شرایط تراریختی موقت گندم قبل از تراریختی دائم آن گامی مؤثر در جهت تولید گندم تراریخت خواهد بود. هدف از این پژوهش بررسی پتانسیل تراریختی موقت گیاه گندم می باشد. در این تحقیق بهینه سازی روش اگرواینفیلتریشن (انتقال ژن تحت خلاء توسط اگروباکتریوم) برای گیاه گندم صورت گرفت. با استفاده از روش اگرواینفیلتریشن اگروباکتریوم احوی سازه بیانی ژن گزارشگر GUS در شرایط مختلف به بافت برگ گیاه گندم وارد شد و بیان ژن گزارشگر GUS در شرایط مختلف بررسی شد. غلظت های متفاوت باکتری شامل 0/8، 0/6، OD(600)=0/4، زمان های قرارگیری در معرض باکتری 20، 30 و 40 دقیقه در شرایط خلاء و همچنین مدت زمان ماندگاری 1، 3، 4 و 6 روز بررسی گردید. میزان بیان موقت ژن گزارشگر GUS در برگها با قرار دادن برگها در محلول X-Glux و شد رنگ آبی بررسی شد. بالاترین سطح بیان ژن GUS در OD(600)=0/4 با قرارگیری به مدت 20 دقیقه در معرض باکتری، پس از 6 روز ماندگاری حاصل شد.

کلیدواژه ها:

اگرواینفیلتریشن ، بیان موقت ، گندم ، بهینه سازی