بیان پروتئین نورآمینیداز نوترکیب ویروس آنفلوانزا سویه واکسینال H۱N۱ در سیستم بیانی Baculovirus

دو آنتی ژن ساختاری هماگلوتینین (HA)و نورآمینیداز (NA)، برای توسعه یک واکسن بر پایه مهندسی ژنتیک در برابر ویروس آنفلوانزا مورد نظر محققین و تولیدکنندگان واکسن مذکور میباشند. واکسن های نوترکیب با استفاده از روش ساده و موثر تولید می شوند و بایستی توسط یک آنتی ژن خاص موجب القای پاسخ ایمنی شوند به نحوی که دارای اثربخشی بیشتری نسبت به واکسن های دارای ویروس کامل باشند. در مطالعه حاضر، ژن نورآمینیداز سویه واکسنی H۱N۱ که نسبت به ژن هامگلوتینین با ثبات تر بوده و دارای موتاسیون های کمتری می باشد توسط واکنش زنجیرهای پلیمراز (PCR) تکثیر شد و سپس در حامل بیانی یوکاریوتی HTA pFastBac قرار گرفت. بیان پروتئین نورآمینیداز بوسیله آزمایش PAGE-SDS و وسترن بلات با استفاده از آنتی بادی پلی کلونال تجاری علیه نورآمینیداز مورد بررسی قرار گرفت. علاوه براین، از روش ایمونوفلورسانس کیفی به منظور ارزیابی آنتی ژن و فعالیت بیولوژیکی پروتئین نوترکیب نورآمینیداز در سطح سلول حشره (Sf۹) آلوده شده به باکولوویروس حامل ژن نورآمینیداز با استفاده از آنتی سرم خرگوش واکسینه استفاده گردید. در نهایت با توجه به کلون تاییدشده ژن نورآمینیداز میتوان ادعا نمود که برای ساخت واکسن نوترکیب آنفلوانزای انسانی قدم مهم و اساسی برداشته شده است.

کلیدواژه ها:

آنفلوانزا ، ریورس ژنتیک ، نورآمینیداز ، واکسن ریکامبیننت ، باکولوویروس