بررسی بیان نسبی ژن متالوتیونین به عنوان نشانگر زیستی آلودگی در کبد جوجه های گوشتی تغذیه شده با نانو ذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت در شرایط تنش گرمایی

چکیده مبسوط مقدمه و هدف: با توجه به ممنوعیت استفاده از آنتی ­بیوتیک ­ها به عنوان یک افزودنی محرک رشد از سال ۲۰۰۶ درصنعت پرورش جوجه ­های گوشتی، محققان همواره به ­دنبال جایگزین مناسبی برای آنتی ­بیوتیک ­ها هستند. نانوذرات نقره با توجه به ویژگی­های ضد باکتریایی، ضد قارچی و ضد ویروسی آن­ها به عنوان یکی از جایگزین­ های پیشنهادی برای آنتی­ بیوتیک­ ها مورد توجه قرار گرفته است و هدف از انجام این آزمایش بررسی اثر نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت بر میزان بیان ژن متالوتیونین به عنوان زیست نشانگر فلزات سنگین، در سلول­های بافت کبد جوجه ­های گوشتی بود. مواد و روش­ها­: برای انجام این تحقیق آزمایشی شامل تیمار شاهد یا کنترل، تیمار شاهد مکمل شده با ۱ درصد زئولیت، تیمار شاهد مکمل شده با ۱ درصد زئولیت پوشش داده شده با ۰/۵ درصد نانونقره، تیمار شاهد مکمل شده با ۰/۱۵ درصد اسید ارگانیک و تیمار شاهد مکمل شده با ۱ درصد زئولیت پوشش داده شده با ۰/۵ درصد نانونقره و ۰/۱۵ درصد اسید ارگانیک، در شرایط اعمال تنش گرمایی و بدون تنش گرمایی طراحی شد. نمونه­ برداری از بافت کبد در روزهای ۲۱ و ۴۲ دوره پرورش انجام و به منظور انجام مطالعات بیان ژن، RNA استخراج و با استفاده از دستگاه الکتروفورز کیفیت آن بررسی شد و پس خالص­ سازی، سنتز cDNA صورت گرفت. در ادامه واکنش زنجیره ای پلیمراز برای نمونه های cDNA حاصل از بافت ها، برای ژن متالوتیونین و همچنین بتااکتین به عنوان ژن مرجع، انجام شد. یافته ­ها: نتایج حاصل از این آزمایش در روز ۲۱ دوره پرورش، نشان دهنده افزایش بیان معنی دار این ژن در بافت کبد جوجه های گوشتی تغذیه شده با تیمار زئولیت (Z بود (۰/۰۵>p). بیان ژن متالوتیونین در بافت کبد جوجه­ های تغذیه شده با تیمار نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت مکمل شده با ۱ درصد اسید ارگانیک در روز ۴۲ دوره پرورش بدون تنش گرمایی و همچنین در روز ۴۲ دوره پرورش با اعمال تنش گرمایی افزایش بیان معنی داری در ژن متالوتیونین در جوجه­ های تغذیه شده با تیمار نانوذرات نقره پوشش داده شده بر زئولیت (NS) و تیمار زئولیت  مشاهده شد (۰/۰۵p<). نتیجه­ گیری: نتایج حاصل از پژوهش حاضر بیان می کند که ژن متالوتیونین می تواند به عنوان یک زیست نشانگر قابل اعتماد فلز سنگین در شرایط نرمال و تنش گرمایی در جوجه های گوشتی در نظر گرفته شود.

کلیدواژه ها:

Broiler ، Biomarker ، Liver ، Metallothionein ، Silver nanoparticles ، جوجه گوشتی ، زیست نشانگر ، کبد ، متالوتیونین ، نانوذرات نقره