ایمنی زایی پروتئین کایمر نوترکیب STXB-Intimin- EscC علیه بیماری زایی باکتری Enterohemorrhagic Escherichia coli O۱۵۷:H۷

انتروهموراژیک اشریشیا کلی سروتیپ O۱۵۷:H۷ یک عامل بیماری زای مهم در بین انسان و حیوانات است که باعث عارضه های گوارشی متعددی از جمله کولیت هموراژیک و در موارد حاد سندرم اورمی همولیتیک (HUS) می شود. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیک ها در عفونت E.coli O۱۵۷:H۷، واکسن ها روشی امیدبخش برای پیشگیر ی از این عفونت را ارائه می کنند. هدف از این تحقیق بررسی ایمنی زایی آنتی ژن کایمر (SEI) StxB-EscC-Intimin علیه باکتری E.coli O۱۵۷:H۷ بود. بیان پروتئین نوترکیب تحت تاثیر IPTG در E.coli BL۲۱ DE۳ القاء و توسط SDS-PAGE ارزیابی شد. پروتئین نوترکیب با ستون کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA خالص و به روش الایزا با استفاده از آنتی بادی اختصاصی ضد توکسین شیگا تایید گردید. ایمنی زایی در موش با پروتئین خالص انجام و تیتر آنتی بادی به روش ELISA تعیین شد. ریزش باکتری و مرگ و میر در موش ها مورد بررسی قرار گرفت. بررسی آماری با آزمون های دانکن و T-test با نرم افزار SPSS انجام شد. بیان پروتئین با وزن مولکولی ۵/۷۴ کیلو دالتون در SDS-PAGE مشاهده شد. حداقل مقدار آنتی ژن شناسایی شده با آنتی بادی مرغی ضد شبه شیگا با استفاده از روش ELISA ۱۵۶نانوگرم بود. ریزش باکتری در موش ایمن تا cfu/ml ۱۰۲ کاهش یافت و ۸۰ درصد از موش های ایمن پس از تزریق LD۵۰۱۰ از باکتری زنده ماندند. نتایج نشان داد که پروتئین نوترکیب کایمر می تواند کاندید واکسن مناسبی علیه E.coli O۱۵۷:H۷ باشد.

کلیدواژه ها:

اشرشیا کلی انتروهموراژیک ، پروتئین کایمر ، واکسن نوترکیب ، اینتیمین ، توکسین شبه شیگا