مطالعه الگوی پروتئوم آنزیم های موثر در فرآیند مایکوپارازیتیسم جدایه جهش یافته قارچ Trichoderma harzianum

این پژوهش به منظور بررسی الگوی بیان آنزیم­های کیتیناز در جدایه­های جهش یافته قارچ Trichoderma harzianum، نسبت به جدایه وحشی انجام شد. ابتدا جدایه­های گونه T. harzianum با دوز بهینه۲۵۰ گری پرتوگاما، در معرض جهش قرار گرفتند. توان آنتاگونیستی جدایه­های جهش­یافته و وحشی با آزمون کشت متقابل در حضور بیمارگر گیاهیSclerotinia sclerotiorum مورد بررسی قرار گرفت. تمامی آنالیزهای آماری با نرم­افزار SAS و آزمون حداقل اختلاف معنی­دار (LSD) انجام شد. پروفایل پروتئینی آنزیم­های تولیدشده کلیه جدایه­ها با آزمون الکتروفورز SDS-PAGE و الگوی پروتئوم گونه وحشی به همراه جدایه جهش یافته Th M۸ با سوبسترای کیتین کلوئیدی و با استفاده از تکنیک الکتروفورز دو­بعدی و نرم­افزار ImageMaster ۲D Platinum مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که اکثر جدایه­های جهش­یافته نسبت به جدایه وحشی در تولید آنزیم­های خارج سلولی کیتیناز، از نظر آماری در سطح پنج و یک درصد دارای اختلاف معنی­دار بودند. همچنین نتایج آزمون آنتاگونیستی نشان داد، پتانسیل کنترل جدایه­های جهش­یافته نسبت به جدایه وحشی در مقابله با قارچ S. sclerotiorum به طور معنی­داری افزایش یافته است. بیشترین و کمترین بازدارندگی به ترتیب مربوط به جدایه Th M۸ با ۷۲ درصد و Th M۳با ۴۳ درصد بازدارندگی بود. از طرفی الگوی پروتئوم بر اساس تکنیک الکتروفورز دوبعدی نشان داد که لکه­های پروتئینی جدایه جهش­یافته در مقایسه با جدایه وحشی به صورت کمی و کیفی متفاوت هستند. این موضوع نشان می­دهد که موتاسیون می­تواند منجر به تغییر در الگوی بیان پروتئین­های مترشحه شود. به طورکلی نتایج این مطالعه نشان داد که تکنیک پرتودهی گاما می­تواند در تولید آنزیم­های موثر در مایکوپارازیتیسم و بهبود پتانسیل کنترل بیولوژیک در مدیریت بیماری­های گیاهی موثر واقع شود.

کلیدواژه ها:

Trichoderma ، gamma-ray ، SDS-PAGE ، ۲D electrophoresis ، Chitinase