مقاله علمی – پژوهشی: جداسازی، تکثیر و انتقال ژن VP۲۸ ویروس عامل لکه سفید میگو در میکروجلبک Chlorella vulgaris به روش الکتروپوریشن (تراواسازی الکتریکی)

بیماری لکه سفید یکی از مهمترین بیماری ها در پرورش میگو می باشد که موجب کاهش تولید و خسارت اقتصادی شدیدی در کل دنیا از جمله ایران گردیده است. مرگ و میر ناشی از این بیماری شدید و بسیار بالا و به ۱۰۰% طی ۱۰-۳ روز از شروع بیماری می رسد. بر اساس آمارهای جهانی سالانه در دنیا حدود ۳۰۰ هزار تن میگو بر اثر این بیماری تلف می شود. برای مثال، در ایران در سال های ۱۳۸۶,۱۳۸۳, ۱۳۹۴,۱۳۸۷، ۱۳۹۵ و ۱۳۹۸ شیوع این بیماری خسارات میلیاردی به تولید کنندگان وارد کرد. با توجه به این که ژن پروتئین ویروسی VP۲۸ یکی از مهم ترین پروتئین های پوششی ویروس بیماری لکه سفید و در چسبیدن و نفوذ به سلول های میگو نقش دارد و از آن جایی که مهم ترین منبع غذایی میگو در مرحله لاروی میکروجلبک می باشد، می تواند منبع مناسبی برای ساخت واکسن باشد. در این تحقیق ژن VP۲۸ به میکروجلبک انتقال داده شد تا از این راه کمکی در جهت تولید واکسن خوراکی برای جلوگیری از بیماری لکه سفیدمیگو انجام گیرد. در این تحقیق نمونه های میگو (Penaeus indicus) مشکوک به بیماری سندروم لکه سفید از استخرهای پرورشی آبادان (مهرماه ۱۳۹۰) به آزمایشگاه موسسه واکسن و سرم سازی رازی-شعبه اراک منتقل و DNA ژنومیک ویروس با استفاده از روش پروتئیناز K و فنل/کلرفرم استخراج شد. با طراحی آغازگرهای اختصاصی ژن VP۲۸ به روش PCR تکثیر و به داخل وکتور pCAMBIA۱۳۰۴ منتقل و نهایتا طی فرایند تراواسازی الکتریکی به میکروجلبک Chlorella vulgaris که خود یکی از میزبان های بسیار مناسب انتقال ژن می باشد، منتقل گردید.

کلیدواژه ها:

VP۲۸ ، white spot ، Microalgae ، Chlorella vulgaris ، Electroporation ، ژن VP۲۸ ، لکه سفید میگو ، میکروجلبک ، کلرلاولگاریس ، الکتروپوریشن