تاثیر مقادیر مختلف آنتی اکسیدان ۴،۲-دی نیتروفنول و لوتئولین بر کیفیت منی خروس طی فرایند انجماد-یخ گشایی

چکیده مبسوط مقدمه و هدف:  طی انجماد اسپرم تولید گونه های فعال اکسیژن و کاهش فعالیت آنتی اکسیدانی، موجب آسیب به ساختار های عملکردی اسپرم می شود. بیشترین تنش به دلیل تولید فراوان گونه های فعال اکسیژن و عدم نفوذپذیری آنتی اکسیدان ها به داخل میتوکندری، متوجه این اندامک می­ شود. در این مطالعه اثرات افزودن ۴ سطح ترکیبی از آنتی اکسیدان ۴،۲-دی نیتروفنول که یک آنتی اکسیدان هدفمند میتوکندریایی است و لوتئولین که از قوی­ترین ترکیبات فلاونوییدی با خاصیت آنتی اکسیدانی و ضدمیکروبی را دارد، در رقیق­کننده لیک بر پایه لسیتین مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش ها: بدین منظور نمونه های منی از ۱۵ خروس سویه راس با سن ۲۸ هفته به روش مالش پشتی-شکمی جمع­آوری شدند. نمونه های منی پس از ارزیابی اولیه باهم مخلوط و پس از رقیق ­سازی و افزودن سطوح مختلفی به ترتیب تیمار ۱ (۰/۵ نانومولار ۴،۲-دی نیتروفنول + ۰/۷۵ میکرومولار لوتئولین)، تیمار ۲ (۰/۵ نانومولار ۴،۲-دی نیتروفنول + ۱ میکرومولار لوتئولین)، تیمار ۳ (۰/۷۵ نانومولار ۴،۲-دی نیتروفنول + ۰/۷۵ میکرومولار لوتئولین)، تیمار ۴ (۰/۷۵ نانومولار ۴،۲-دی نیتروفنول + ۱ میکرومولار لوتئولین) از آنتی اکسیدان ها، نمونه ­ها ابتدا برای تعادل دمایی در دمای ۴ درجه سانتی گراد بمدت ۲ ساعت نگهداری شده و پس از لود شدن در پایوت های ۰/۲۵ میلی لیتری در فاصله ۷ سانتی متری بوسیله بخار ازت منجمد و سپس در داخل ازت مایع غوطه ور شدند. پس از یخ­گشایی، نمونه ها از نظر فراسنجه­  های عملکردی و بیوشیمیایی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفتند. یافته ها: نتایج پژوهش حاضر نشان دادند که افزودن تیمار های ۲ و ۳ به رقیق­ کننده لیک طی انجماد و یخ گشایی اسپرم خروس باعث افزایش معنی دار فراسنجه های تحرک کل و حرکت پیش رونده گردید و همینطور تیمار ۳ سبب افزایش معنی دار سرعت اسپرم در خط مستقیم و  معیار مستقیم بودن حرکت اسپرم نیز شد، تیمار ۲ و ۳ زنده مانی را نیز بصورت معنی داری نسبت به گروه شاهد افزایش داد و سبب کاهش میزان مالون دی آلدهید مایع منی و اسپرم های با ریخت شناسی غیر طبیعی طی انجماد و یخ گشایی شد (۰/۰۵>p)  همینطور تیمار ۳ توانست میزان یکپارچگی غشا پلاسمایی نسبت به گروه کنترل افزایش بدهد (۰/۰۵>p). نتیجه گیری: نتایج مطالعه حاضر نشان می ­دهد که استفاده ترکیبی این دو آنتی اکسیدان سبب هم افزایی خاصیت هر دو آنتی اکسیدان شده و سبب بهبود فراسنجه های کیفی و کمی اسپرم خروس طی مرحله انجماد و یخ گشایی شده است.  

کلیدواژه ها:

Flavonoid ، Mitochondria ، Oxidative stress ، Sperm ، Uncoupling ، اسپرم ، پروتئین جفت نشده ، تنش اکسیداتیو ، فلاونویید