جداسازی و بررسی میزان فعالیت آنزیم پروتئاز در باسیلوس های جداسازی شده از چشمه های آب گرم محلات

پروتئازها پرمصرف ترین آنزیم های صنعتی هستند که کاربردهای زیادی در زیست فناوری دارند. به طوری ­که حدود ۶۰ درصد از بازار جهانی آنزیم های صنعتی را به­ خود اختصاص داده اند. میکروب ها به ­دلیل رشد سریع، سهولت کشت، دستکاری ژنتیکی در جهت تولید بهینه آنزیم، از منابع عمده تولید پروتئازها به ­شمار می روند. این مطالعه با هدف جداسازی گونه های باسیلوس گرمادوست مولد آنزیم پروتئاز از چشمه های آب گرم محلات واقع در استان مرکزی و ارزیابی قابلیت تولید آنزیم پروتئاز در این گونه ها انجام شده است. به منظور جداسازی و شناسایی اولیه میکروارگانیسم های دارای فعالیت پروتئولیتیک از محیط کشت Skim milk agar همراه با آزمون های بیوشیمیایی استفاده شد. وجود ژن پروتئاز در گونه های باکتریایی با روش PCR بررسی گردید و جهت تشخیص گونه های باکتریایی ژن ۱۶ SrRNA به روش PCR تکثیر و تعیین توالی گردید. سنجش فعالیت پروتئاز به روش لوری صورت گرفت و بهترین گونه باسیلوس ازنظر فعالیت پروتئاز شناسایی گردید. ۹ گونه باکتریایی توسط تست های بیوشیمیایی به عنوان گونه های برتر مولد آنزیم پروتئاز جداسازی شدند. در بررسی بیان ژن پروتئاز و توالی یابی ژن ۱۶ SrRNA، ۷ گونه باکتریایی بیش ­ترین قرابت را با گونه های باسیلوس نشان دادند. در سنجش فعالیت آنزیم به ­ترتیب سه گونه باکتریایی DA۳، DA۲ و BN۲ در دمای ۴۷ درجه سانتی گراد و در pH معادل ۸ بیش ­ترین فعالیت را داشتند. با توجه به کاربردهای فراوان آنزیم پروتئاز در صنعت به ­نظر می رسد استفاده از سویه های محلی می تواند در دستیابی به تولید بالای آنزیم پروتئاز و بی نیازی کشور به واردات این محصول مفید واقع شود.

کلیدواژه ها:

آنزیم پروتئاز ، پروتئولایتیک ، باسیلوس ، مقاومت گرمایی ، جداسازی