رونویسی غیر متعارف cDNA ژن فعال کننده پلاسمینوژن انسانی (t-PA) در گیاهان تراریخت توتون

پروتئین rt-PA یک عامل اختصاصی فیبرین است که موجب حل کردن لخته  های خونی و جلوگیری از سکته  های قلبی و مغزی می­گردد. این پروتئین به فرم دارویی در میزبانهای مختلف بصورت نوترکیب تولید شده است. هدف از این طرح بررسی بیان آن در گیاهان توتون تراریخت بودکه در آن مورد جالبی از نحوه رونویسی ژن در گیاهان تراریخت مشاهده گردید. رونویسی ژن با استفاده از آغازگرهای اختصاصی به روش RT-PCR انجام گرفت. نتایج روی الکتروفرز ژل آگارز ۸/۰ درصد نشان داد که علاوه بر نوار اختصاصی t-PA (۱.۷ kb) یک محصول غیر منتظره دیگر به طولbp  ۶۵۰ هم در گیاهان تراریخت تکثیر می شد. پس از بازیابی آن قطعه از ژل و  توالی یابی، مشخص شد که این محصول اضافی با cDNA مربوط به ژن t-PA ۹۹% همولوژی دارد. به عبارت دیگر این باند اضافی دارای بخشی از توالی cDNAی ژن t-PA می باشد. در ادامه توالی قطعه اضافی با نرم افزار MegAlign با توالی cDNA ژن t-PA همردیف شد تا نواحی همپوشان و نیز نواحی حذف شده از این قطعه مشخص شود. در نهایت از پایگاه اطلاعاتی CDD موجود در NCBI جهت مشخص کردن دامنه  های حذف شده و باقی مانده استفاده شد. نتایج این بررسی نشان داد که توالی مربوط به دامنه کرینگل  ها حذف و توالی مربوط به دامنه سرین پروتئازی آن باقی مانده است. از طرفی این دمین سرین پروتئازی می باشد که کار اصلی t-PA را انجام می­دهد به گونه­ای که مهندسین ژنتیک در تلاش برای تولید پروتئینی از t-PA می باشند که فقط دارای همین دمین پروتئازی باشد. در حالی که در اینجا گیاه این کار مهندسی را به صورت طبیعی انجام می­دهد. این نتایج احتمالا به علت پردازش متغیر RNA می باشد

کلیدواژه ها:

: توتون تراریخت ، دمین ، کرینگل و t-PA نوترکیب