خالص سازی جزئی آسپاراژیناز از کبد اردک موسکووی

آسپاراژیناز آنزیمی است که هیدرولیز آسپاراژین به آسپارتیک اسید را کاتالیز میکند. آسپاراژینازها به طور طبیعی توسط میکروارگانیسمها تولید میگردند. هر دو سوبسترا و محصول این آنزیم طی واکنش صورت گرفته، در متابولیسم اکثر موجودات نقش مهمی را ایفا می کند. از جمله عملکرد های فیزیولوژیک ارزشمند این آنزیم، کنترل بیان و فعالیت های سلولی مناسب در ایجاد تعادل بین اسید های آمینه بدن می باشد. علاوه بر آن آنزیم ال آسپاراژیناز نقش مهمی در درمان لو سمی لنفوبلا ستی حاد ایفا می کند. هدف این تحقیق برر سی خ صو صیات سینتیکی آنزیم آ سپاراژیناز کبد اردک مو سکووی و تاثیر پارامتر های مختلف بر فعالیت این آنزیم است. در این پژوهش آنزیم آسپاراژیناز از کبد اردک موسکووی با استفاده از روش های هموژنیزاسیون در بافر تریس pH ۵/۸، سانتریفیوژ، رسوب دهی با آمونیوم سولفات ۲۰ و ۶۰ درصد و دیالیز در دمای۳ درجه سانتیگراد، به صورت جزئی جداسازی شد. بعد از استخراج فعالیت آنزیم طبق روش ریستون با معرف نسلر تخمین زده شد. در این تحقیق فعالیت ویژه آنزیم آسپاراژیناز جداسازی شده از کبد اردک U/mg ۳۵/۴۰ تعیین شد. pH بهینه آنزیم ۷ و دمای بهینه آن ۴۰ درجه سانتی گراد بدست آورده شد. مقادیر Km و Vmax آنزیم به ترتیب برابر ۱۲۷/۲۹۵ میلی مولار و۳/ ۶۳۹ میلی مولاربردقیقه محاسبه شد. با توجه به عوارض جانبی آسپاراژیناز تهیه شده از منابع میکروبی استخراج و خالص سازی این آنزیم از سایر منابع از جمله کبد اردک موسکووی برای مطالعات آینده پیشنهاد می گردد.

کلیدواژه ها:

خالص سازی جزئی ، معرف نسلر ، پارامترهای سنتیکی