بررسی میزان بیان ژن‌ ID1 در سلول ‌های AGS ترنسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV3-tagD

مقدمه: پروتئین ID، باعث افزایش تکثیر سلولی می شود و از طرفی تمایز را مهار کرده که ارتباط آن با روند تومور­زایی روده را مشخص می­ کند. عفونت هلیکوباکتر با بیان ژن ­های مختلف ID در ارتباط است و بنا بر این هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن­ ID1 در سلول ­های AGS ترانسفکت شده با وکتور نوترکیب pFLAG-CMV-3-tagD است. مواد و روش­ ها: در پژوهــش حاضر سلول ­های AGS در محیط کشت RPMI-1640 حاوی درصد سرم جنین گاوی رشد داده­ شد. این سلول­ ها با دو پلاسمید pFLAG-CMV-3-tagD یا pFLAG-CMV-3 ترانسفکت شدند و سلول ­های دریافت کننده پلاسمید با افزودن 600 میلی­ گرم در لیتر G418، انتخاب گردیدند. سپس RNA کل سلول با استفاده از محلول RNX-Plus تخلیص شد و سنتز cDNA با کمک کیت انجام شد. سطح بیان mRNA ژن ID1 به روش q-RT PCR و با کاربرد پرایمرهای مناسب بررسی شد. در نهایت با استفاده از نرم افزار  SPSSو آزمون ‌های آماری t-test Indepent  بیان هر یک از ژن­ ها مورد بررسی قرار گرفت. یافته های پژوهش: با روش RT-PCR، بیان موفقیت آمیز ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در سلول ­های AGS تایید شد. آنالیز بیان ژن نشان داد که بیان ژن­ ID1 به صورت معنی ‌داری در سلول ­های AGS تیمار شده با tagD نسبت به سلـــول­ های کنترل، کاهـــش یافـــته است(P=0.0113). بحث و نتیجه گیری: تحقیق حاضر نشان داد که بیان ژن­ ID1 در سلول ­های تحت تیمار با ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری، تغییر می ­یابد و به نظر می ­رسد، ژن tagD هلیکوباکتر پیلوری در ایجاد این تغییر بیان نقش داشته­ باشد.  

کلیدواژه ها:

Helicobacter pylori ، TagD ، ID1 ، باکتری هلیکوباکتر پیلوری ، tagD ، ID1