بررسی الگوی ایزوآنزیمی سلول های ‭5-Hela, SP2/0, BHK, MRC ‬و ‭Vero‬

کشت سلول برای تولید بسیاری از محصولات بیولوژیک و بیوتکنولوژیک مورد استفاده قرار می گیرد. آلودگی متقاطع ‭(Cross-contamiination) ‬در کشت سلول یکی از خطرات تهدیدکننده کیفیت مواد بیولوژیک می باشد. چندین روش استاندارد برای بررسی آلودگی متقاطع و تعیین هویت سلولها وجود دارد که شامل تعیین مارکرهای ایمنولوژیک، ایزوانزیمولوژی، تعیین کاریوتیپ و انگشت نگاری ‭DNA ‬می باشد. در روش انزیمولوژی تعداد و مسافت طی شده توسط ایزوآنزیمهای حاصل ازعصاره های سلولی که بر روی ژل الکتروفورز به صورت باندهای رنگی نمایان می شوند، بررسی و مقایسه شده و گونه منشا سلول مشخص می شود. در این طرح، چهار آنزیم لاکتات دهیدروژناز ‭LDH‬، گلوکز 6 فسفات دهیدروژناز G6‭PD‬، مالات دهیدروژناز ‭MDH ‬و نوکلیوزید فسفوریلاز ‭NP ‬بر روی عصاره های به دست آمده از سلولهای 5‭-MRC(‬انسانی) ، ‭Vero (‬میمون)، ‮‭21‬‭-BHK (‬همستر)و 0‭/SP‬2 (موش) و به همراه سلول L‮‭929‬ به عنوان استاندارد و ‭Hela ‬به عنوان کنترل بررسی شد. ژلهای آگارز مختلف، ولتاژها و زمانهای متفاوت، سوبستراها، و شرایط متفاوت انجام الکتروفورز، مورد بررسی قرار گرفته و روش انجام کار و شرایط کار ‭set up ‬گردید. در این طرح با بررسی الگوی ایزوآنزیمی چهار آنزیم بر روی عصاره سلولها تایید گردید سلولهای5‭-MRC ‬و ‭Vero ‬جز پرایمتها و سلولهای ‮‭21‬‭-BHK ‬و 0‭/SP‬2 جز جوندگان می باشند. نتایج به دست آمده از بررسی ژلها با بررسی مولکولی نیز مورد تایید قرار گرفت.