جداسازی وشناسایی باکتری های اسیدلاکتیک به عنوان پروبیوتیک از نمونه های عسل استان اصفهان

به منظور جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری های اسید لاکتیک موجود در عسل و استفاده از آن ها به عنوان پروبیوتیک، نمونه های عسل از شهرستان های نجف آباد، خوانسار و فریدونشهر (استان اصفهان) تهیه و به آزمایشگاه منتقل گردید. در شرایط کاملا استریل از نمونه های عسل به محیط کشت مخصوص باکتری های اسید لاکتیک (ام. آر. اس براث) تلقیح و سپس به محیط کشت ام. آر. اس آگار منتقل و به روش پخشی بر روی آگار کشت داده شد. درنهایت نمونه ها در انکوباتور با دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت گذاشته شد. از کلنی های مختلف ظاهر شده، کشت خالص تهیه گردید و آزمون های کاتالاز، اکسیداز و رنگ آمیزی گرام انجام شد و در انتها 9 باکتری انتخاب گردید تا به روش 16S-rRNA شناسایی شوند. پس از خالص سازی محصول PCR ، نمونه ها جهت تعیین توالی نوکلیوتیدها به آزمایشگاه ارسال گردید. به منظور تعیین نام باکتری ها، توالی های به دست آمده پس از ویرایش، در سایت (National Center Of Biotechnology Information) NCBI مورد بررسی، مشابهت و انطباق قرار گرفت. تعداد هشت باکتری از نوع باکتری اسید لاکتیک و یک باکتری غیر اسیدلاکتیکی تشخیص داده شد. تعداد دو باکتری به منطقه نجف آباد، و به مناطق خوانسار و فریدونشهر هر کدام سه باکتری تعلق داشت. باکتری های اسید لاکتیک از سه جنس Gluconobacter Weissella, و Aerococcus با میزان مشابهت 100 درصد به دست آمدند.کلید واژه: عسل، جداسازی، شناسایی مولکولی، باکتری اسید لاکتیک