تهیه جمعیت های اصلاحی مقاوم به بیماری های ریزومانیا، نماتد مولد سیست و نماتد گره ریشه در چغندرقند با بهره گیری از نشانگرهای مولکولی

به منظور تهیه جمعیت های اصلاحی مقاوم به بیماری های ریزومانیا، نماتد مولد سیست و نماتد گره ریشه در چغندرقند از 4 لاین اصلاحی موسسه (S1-920756, S1-920760, SB-33-HSF. 5, SB-33-HSF.6) با زمینه ژنتیکی مقاوم به ریزومانیا و نماتد مولد سیست و یا ریزومانیا و نماتد گره ریشه به شرح زیر استفاده شد. قبل از شروع پروژه، بذر چهار لاین مورد نظر در شهریور سال 1395 در گلخانه کشت ‎گردید. پس از جوانه‎زنی و ظهور برگ‎های کوتیلدونی، در دو لاین مقاوم به ریزومانیا و نماتد گره ریشه گیاهچه‎های با رنگ هیپوکوتیل قرمز و در دو لاین مقاوم به ریزومانیا و نماتد مولد سیست گیاهچه‎های با رنگ هیپوکوتیل سبز حفظ شدند. گیاهچه‎های باقی‎مانده در مرحله چهاربرگی هر یک به یک گلدان یک لیتری منتقل شدند و در طول زمستان در شرایط سردخانه در دمای 8-4 سانتی‎گراد ورنالیزه گردیدند. در بهارسال 96 بوته ها به قطعات ایزوله منتقل و بوته های هر لاین بصورت یک خط در میان کشت شدند. در تابستان 96 بذر بصورت بالک از روی هر یک از پایه های مادری برداشت و در شرایط گلخانه از هر شماره 100 تا 150 عدد گلدان کشت شد. در مرحله گیاهچه ای بوته های هیپوکوتیل قرمز به عنوان نسل اول تلاقی (F1) نگه داری و سایر بوته ها حذف شدند. گیاهچه‎های باقی‎مانده هر یک به یک گلدان یک لیتری انتقال یافتند. در پاییز سال 96 از بوته های F1نمونه برداری برگ و استخراج DNA انجام شد. با استفاده از نشانگرهای مولکولی SNP یا STSبوته های حامل ژن های مقاومت به دو نوع نماتد مولد سیست و نماتد گره ریشه شناسایی شدند (لازم به ذکر است همه لاین های مورد تلاقی بر اساس نتایج آزمون های مولکولی سال های قبل از نظر مقاومت به ریزومانیا به صورت هموزیگوت غالب بوده اند و در نتیجه نتاج F1 آنها پس از تلاقی با یکدیگر هموزیگوت باقی مانده بودند). در زمستان سال 96 بوته های انتخاب شده ورنالیزه شدند. در بهار سال 97 بوته های F1منتخب ورنالیزه شده به مزرعه به قطعه ایزوله جهت تکثیر بذر منتقل شدند. در تابستان سال 97 بذر جمعیت اصلاحی نسل دوم تلاقی (F2) حامل بوته های هموزیگوت سه مقاومته تهیه شد تا در پروژه های آتی، لاین های سه مقاومته هموزیگوت شناسایی شوند.واژه های کلیدی: چغندرقند، ریزومانیا، نشانگر مولکولی، نماتد گره ریشه، نماتد مولد سیست.