شناسایی خصوصیت مولکولی سویه باکتری کلستریدیوم تتانی ‭Clostridium Tetani ‬مورد استفاده درتهیه واکسن کزاز

باکتری مولد بیماری کزاز یک باکتری بی هوازی باسیلی شکل و اسپوردار با اسپور انتهایی یا نزدیک به انتها می باشد که منظره چوبک طبل یا راکت تنیس را به نمایش می گذارد. عامل ایجاد بیماری سم باکتری به نام تتانو اسپاسمین است، که جایگاه آن در پلاسمید خارج کروموزمی باکتری می باشد. تهیه کشتهای مجدد، از قسمتهای مهم پروسه تولید واکسن کزاز می باشد. پاسا ژهای متوالی سویه های واکسینال کزاز، در فرآیند تولید واکسن در مدت زمان طولانی بیش از چند دهه احتمال بروز جهش های ژنتیکی در ژنوم سویه های واکسینال را افزایش میدهد. که بروز اینگونه جهشهای احتمالی ممکن است تولید آنتی ژن های ایمنی زای مورد نیاز برای انگیزش پاسخهای ایمنی در انسان را تحت الشعاع قرار دهد . لذا در این طرح با استفاده از روشهای رایج، ژنوم سویه های واکسینال مورد استفاده بین سالهای ‮‭1990-2011‬ به منظور شناسایی تغییرات زنومی ناشی از جهشهای احتمالی درمقایسه با سویه های استاندارد مقایسه شد. با بهره بردن از روش ‭(Pulsed- Field Gel Electrophoresis (PFGE ‬الگوی ژنومی و مولکولی سویه های واکسینال کزاز مورد مصرف درتهیه واکسن کزاز مورد بررسی قرار گرفت، تا از عدم تغییرات در ژنوم سویه های موردنظر اطمینان حاصل گردد. بعد از شناسایی بیوشیمیایی و مولکولی سویه ،ژنوم کامل باکتری، بر اساس پروتکل اصلاح شده گرم مثبتها ، استخراج شده و سپس برای ‭PFGE ‬، توسط آنزیم محدود الاثر ‭SmaI ‬برش خورد. الگوی هضم آنزیمی حاصل، برای مطالعه ژنتیکی استفاده گردید. بررسی های به عمل آمده توسط تکنیک ‭PFGE‬، نشان داد که سویه مورد استفاده برای تولید واکسن کزاز در دهه های گذشته، به رغم پاسازهای متعدد، دچار تغییرات زنتیکی نشده و از ثبات بر خوردار بوده است. در نتیجه ایمنی و سالم بودن واکسنهای تولیدی توسط موسسه رازی برای این باکتری به تایید رسید.