جداسازی و شناسایی و ویروس های آنفلوانزا طیور نیوکاسل و برونشیت از کمپلکس تنفسی طیور در استان فارس

سابقه و هدف : بیماری نیوکاسل و آنفلوانزا بیماری ویروسی واگیر دار پرندگان است و یکی از مهمترین بیماریهای طیور در سراسر جهان است . هم پرندگان اهلی و هم وحشی می توانند بوسیله این ویروس دچار بیماری شوند. در بین پرندگان مرغ های خانگی نسبت به این بیماری مستعدتر هستند .این بیماری بوسیله تماس مستقیم با قطرات تنفسی- ترشحات پرندگان عفونی شده و از طریق مدفوع آنها منتقل می شود.کنترل بیماری نیوکاسل و آنفلوانزا درمناطق اپیدمیک بستگی به واکسیناسیون آن منطقه دارد. واکسن های بیماری نیوکاسل به دوصورت زنده وغیر فعال شده (همراه با واکسن آنفلوانزا) درایران تهیه می گردد. امروزه در بسیاری کشورهای دنیا واکسن کلون شده مورد استفاده قرار می گیرد. در حال حاضر با انجام واکسناسیون سالانه تعداد قابل توجهی از پرندگان صنعتی درگیر با این ویروس می گردند که این امر منجر به خسارات قابل توجهی به صنعت مرغداری می شود. لذا تشخیص سریع و به موقع بیماری و تفکیک این بیماری از دیگر بیماریها و جداسازی ویروس و در نهایت انجام مطالعات مولکولی ویروس بدست آمده و بررسی تغییرات احتمالی آنها بسیار حایز اهمیت است. این امر می تواند منجر به دست یافتن اطلاعاتی در زمینه تغییرات احتمالی بوجود آمده در این ویروس ها گردد، که این مسیله نقش بسزایی در تهیه و ارزیابی واکسن های تولید شده برای این ویروس دارد. نظر به اینکه غالبا تشخیص بیماریهای ویروسی از روی علایم ظاهری و کلینیکی می باشد و با توجه به اینکه این علایم در بسیاری از بیمارها مشابه می باشند تشخیص قطعی معمولا وجود ندارد و تنها راه تشخیص قطعی بیماری جداسازی ویروس می باشد، که این امر به دلیل مشکلات خاص و تکنیک های خاص و هزینه بالا امکانپذیر نمی باشد. در این تحقیق مطالعات مولکولی صورت گرفت و علایم کلینیکی و جداسازی ویروس با یکدیگر مقایسه خواهند شد. مواد و روش ها: در مجموع ‮‭652‬ نمونه سواب کلواک(‮‭364‬) ، بافت نای (‮‭288‬) و ‮‭300‬ نمونه خون از گله های مشکوک به ابتلا به بیماری تنفسی جمع آوری شد. نمونه ها بعد از آماده سازی به تخم مرغ های جنین دار تزریق شد. پس از برداشت مایع آلانتوییک، نمونه های ‭HA ‬مثبت بوسیله آنتی سرم استاندارد ضد ویروس نیوکاسل و آنفلوانزا جهت تعیین تحت تیپ بررسی شدند. در نهایت برای تشخیص قطعی ویروس روش مولکولی ‭RT-PCR ‬همراه با پرایمرهای اختصاصی برای نیوکاسل و آنفلوانزا مورد استفاده قرار گرفت. نتایج: از نمونه های جمع آوری شده از ‮‭30‬ مرغداری مشکوک به بیماری و با توجه به نتایج به دست آمده از تست اولیه ‮‭43‬ ، ‭HA ‬نمونه نتیجه مثبت نشان دادند لذا نسبت به انجام تکنیک ‭RT-PCR ‬روی نمونه ها اقدام گردید که در این بین ‮‭12‬ نمونه از نظر نیوکاسل مثبت و ‮‭31‬ مورد آنفلوانزا مثبت نشان دادند. بحث و نتیجه گیری: مثبت بودن نتایج از نظر وجود نیوکاسل و آنفلوانزا نشان دهنده امکان ابتلای جوجه های صنعتی حتی با توجه به واکسیناسیون آنها به این ویروس می باشد همچنین با توجه به نوع بیماری درگیر کننده گله ها میتوان بیان کرد که این ویروسها در ایجاد بیماری های تنفسی نقش دارد و میتوان آنرا به عنوان یکی از خطرناک ترین ویروس های بیماریزا در میان عوامل ایجاد کننده بیماری تنفسی در میان طیور معرفی کرد. واژه های کلیدی: نیوکاسل، آنفلوانزا، بیماری های تنفسی، ‭RT-PCR ‬، ‭HA ‬، ‭HI‬، H9N2