تولید کیت نانوبیوسنسور کوانتوم دات جهت ردیابی ناقل بیماری رایزومانیای چغندر قند در خاک و گیاهان آلوده

بیماری ریشه گنایی چغندرقند (ریزومونیا)، یکی از مهمترین بیماری های ویروسی در چغندرقند می باشد. ع ام ل این بیماری وی روس زردی نکروتیک رگب رگ چغن درقن د است. قارچ ‭Polymyxa betae ‬در ریشه گیاهان آلوده به صورت پارازیت اجباری رشد میکند و به عنوان تنها ناقل طبیعی این ویروس شناخته شده است. شناسایی گیاهان آلوده عمدتا بر اساس مشاهده مستقیم اسپورهای استراحتی درون بافت ریشه گیاه می باشد. علی رغم سهولت اجرای این روش در شناسایی گیاهان آلوده، انجام مطالعات تکمیلی و کمی جهت مقایسه گیاهان مختلف از نظر میزان آلودگی همواره با مشکلاتی همراه بوده است. در این خصوص روشهای مولکولی، از قبیل ‭Real time-PCR‬، و یا روش های سرولوژیکی مانند ‭DAS-ELISA‬، می تواند مورد استفاده قرار گیرد. روش های مذکور علیرغم اختصاصیت بالا به علت گران بودن مواد مورد استفاده و زمان زیاد برای اجرای آزمون های مربوطه، همواره با مشکلاتی همراه بوده اند. در این تحقیق قابلیت استفاده از سیستم ‭FRET ‬برای شناسایی قارچ ناقل بیماری ریزومانیا مورد بررسی قرار گرفته است. از آنتی بادی های اختصاصی بر علیه قارچ ‭P. betae ‬جهت استفاده درآزمون تشخیصی الیزا و همچنین اتصال به ذرات کوانتوم دات استفاده گردیده است. به منظور انجام اتصال به مولکول های ردامین، تولید پروتیین خالص‭GST ‬قارچ به صورت نوترکیب در باکتری با استفاده از سازه های بیانی انجام گرفت. سپس آنتی بادی ها و پروتیین نوترکیب به ترتیب با نانوذرات کوانتوم دات و رودامین کانژوگه شده و سیستم ‭FRET ‬طراحی و توسط آنالیزهای مربوطه تایید گردید. در این سیستم زمانیکه نمونه مورد آزمایش آلوده به قارچ باشد، ‭GST ‬آزاد موجود در نمونه های آلوده، جایگزین ‭GST ‬کانژوگه شده با رودامین می شود و نهایتا مقدار جذب کاهش می یابد در حالیکه نمونه سالم تغییری در جذب بوجود نمی آورد. نتایج استفاده از کیت فوق جهت شناسایی قارچ پلی میکسا در نمونه های گیاهی، حاکی از قابلیت بالای آن درتشخیص وجود آلودگی در گیاهان آلوده در حداقل زمان ممکن می باشد. کلمات کلیدی: ریزومانیا، گلوتاتیون-اس-ترانسفراز- نانوبیوسنسور-کوانتوم دات-رودامین