تاثیر سدیم والپروات بر تمایز سلولهای بنیادی مشتق از چربی انسان به سلولهای شبه کاردیومیوسیت در کشت دو بعدی و شرایط داربست فیبرینی

زمینه و هدف:سکته های قلبی یکی از علل مهم مرگ در جهان هستند سلول درمانی با سلول های بنیادی برای بهبود مشکلات قلبی امیدبخش بودند. سلول های بنیادی مشتق از چربی ‎انسانی hADSCs امروزه یکی از منابع مفید سلول های بالغ بنیادی اند. سازماندهی کروماتین یکی از مکانیسم های تنظیمی برای تمایز سلولهای بنیادی هستند .استیلیشن یکی از مهمترین تغییرات پیش تمایزی هیستون می باشد بنابراین مهارکننده های داستیلاز HDACIs استیلیشن هیستون ها را افزایش می دهند. والپروئیک اسید VPA یک HDACI قدرتمند است که میتواند تمایزسلول های بنیادی را در مراحل اولیه مدیریت کند.هدف این مقاله مطالعه اثر والپروئیک اسید به عنوان یک القا کننده بر تمایز سلولهای کاردیومیوسیت ازhADSCs در محیط کشت فلاسک 2D و شرایط داربست فیبرینی 3D است.مواد و روش ها: چربیها از بافت چربی پاراورتبرال سه زن داوطلب سالم تهیه شد.بعد از سانتریفیوژ و جداسازی ،hADSCTدر محیط کشت با مکمل، در یک اینکوباتور در دمای 37 درجه و اتمسفرco2 5درصد کشت داده شد .قدرت تمایز hADSCs به سلول های آدیپوبلاست، استئوبلاست و کندروبلاست آزموده شد.با توجه به سمیت VPA دوز مناسب برای ادامه مطالعه مشخص شد.برای هر دو محیط کشت 2D و3D گروه کنترل غیر وابسته منفی که توسط والپروئیک اسید برخورد داده نشده بودند در نظر گرفته شد.بیان ژن های کاردیومیوسیتی با روش qRT-PCR وساخت پروتیین های کاردیومیوسیتی با روش های ایمونوسایتوکمیستری انالیز شد.کد اخلاق: IR.KMU.REC.1395-961یافته ها: hADSCsقدرت تمایز به استئوبلاست آدیپوسیت و کندروسیت دارند. hADSCs توانایی اتصال و توزیعدرداربست فیبرینی رادارند. با توجه به اثرات سدیم والپروات بر فعالیت متابولیسمی سلول ها دوز1 میلی مول برای ادامه مطالع انتخاب شد.مواجهه با VPA ووجود داربست فیبرینی بیان ژن، وVPA بیان پروتئین را در روند تمایزبه طور معناداری افزایش میدهند.نتیجه گیری:VPA توانایی القای تمایز سلول های بنیادی مشتق از چربی به سلولهای شبه کاردیومیوسیتی دارد.داربست فیبرینی با بیان بالای مارکر های کاردیومیوژنیک درmRNA وسطوح بالای پروتئین باعث بهبود اثرالقایی VPA میشود.

کلیدواژه ها:

سلولهای بنیادی مشتق از چربی ، تمایز ، سلول های شبه کاردیومیوسیتی ، داربست فیبرینی ، سدیم والپروات ، مارکرهای قلبی