ارتباط ژن سوپر اکسید دیسموتازانسانی با بیماری اسکلروز جانبی آمیوتروفیک در لوپ 4

سوپراکسید دیسموتاز انسانی یک آنزیم همودیمر است که هر زیر واحد آن دارای یک بشکه ی بتا میباشد که از 8 رشته ی بتا تشکیل شده ا ست.که با هفت لوپ به همدیگر متصل شده ا ست. هر زیر واحد دارای یک یون مس با نقش کاتالتیک و یک یون روی با نقش ساختاری میباشد. سوپراکسید دیسموتاز یک نوع آنزیم آنتی اکسیدان است که آنیون سوپر اکسید تولید شده را تخریب میکند. در این تحقیق پلا سمید pET28a حاوی ژن کد کننده سوپر اکسید دیسموتاز انسانی و E.coli سویه DH5α مورد ا ستفاده قرار گرفت. سپس محصول تکثیر با ا ستفاده از کیت شرکت فرمنتاز خالص شد و با افزودن DpnI و تیمار به مدت 16 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد هضم آنزیمی پلاسمید الگو و انتقال پلاسمید به سلول E. coli سویه DH5α با ا ستفاده از روش شیمیایی انجام شد. جهت اطمینان از انتقال پلا سمیدها، باکتری ها روی محیط حاوی آنتی بیوتیک منا سب (کانامای سین) کشت داده شدند. برای اطمینان بیش تر، ا ستخراج پلا سمیدها در حجم کم با ا ستفاده از کیت ا ستخراج پلا سمید صورت گرفت. پس از حصول اطمینان از کیفیت ا ستخراج پلا سمید از طریق بررسی برروی ژل آگارز %1 ، نمونه ها جهت تعیین ترادف به شرکت تکاپو زیست ار سال شد ردیف نوکلئوتیدی و پروتئینی نمونه های وحشی تایید شد. مطالعات ما با ا ستفاده از نرم افزار yasara و سایت expasy ن شان داد تغییر در لوپ 4 با بیماری اسکلروز جانبی آمیوتروفیک در ارتباط است.

کلیدواژه ها:

سوپر اکسید دیسموتاز ، اسکلروز جانبی آمیوتروفیک ، لوپ 4