ورود
مقالات فارسیISIکنفرانسهاژورنالها

جداسازی، بیان ژن و تولید پروتئین افکتور PthA باکتری Xanthomonas citri subsp citri عامل بیماری شانکر مرکبات

محل انتشار: فصلنامه بیوتکنولوژی کشاورزی، دوره: 7، شماره: 2
سال انتشار: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: فارسی
مشاهده: 600

فایل این مقاله در 16 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

این مقاله در بخشهای موضوعی زیر دسته بندی شده است:

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:
https://civilica.com/doc/864949

شناسه ملی سند علمی:

JR_JOAGK-7-2_010

تاریخ نمایه سازی: 20 خرداد 1398

چکیده مقاله:

بیماری شانکر باکتریایی مرکبات از جمله مهمترین بیماری های باغات لیموی مکزیکی در جنوب کشور می باشد که توسط باکتری Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) ایجاد می شود. پروتئین PthA باکتری عامل شانکر مرکبات، به عنوان پروتئین افکتور، نقش اساسی در فرایند بیماری زایی دارد و لذا غیر فعال سازی آن با استفاده از آنتی بادی می تواند منجر به ایجاد مقاومت بر علیه بیماری شود. در این تحقیق جداسازی و بیان ژن pthA و خالص­سازی پروتئین حاصل از آن صورت پذیرفته است. برای این منظور با استفاده از منابع اطلاعاتی بانک ژن، آغازگرهای اختصاصی برای جداسازی ژن pthA  طراحی شد و سپس قطعه ژنی مربوطه در ناقلpTZ57R/T همسانه سازی گردید. ژن مزبور سپس به صورت متصل به دنباله شش تایی هیستیدین در ناقل بیانی باکتریایی pET28a همسانه سازی گردیده و بیان آن به صورت نوترکیب در سویه BL21(DE3)  باکتری Escherichia coli صورت پذیرفت. خالص­سازی پروتئین نوترکیب PthA در شرایط طبیعی غیر واسرشتی و با استفاده از روش کروماتوگرافی تمایلی  بر روی ستون نیکل صورت پذیرفت. صحت بیان پروتئین مذکور با روش های الکتروفورز پروتئین و وسترن بلاتینگ با استفاده از آنتی بادی های اختصاصی توالی شش تایی هیستیدین مورد بررسی و تایید قرار گرفت. پروتئین نوترکیب خالص بدست آمده می تواند به عنوان آنتی ژن برای تولید آنتی بادی های نوترکیب مونوکلونال مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

نویسندگان

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Alizadeh A, Rahimian H (1989). Citrus canker in Kerman province. Iranian ...
  • Al-Saadi A, Reddy JD, Brunings A, Gabriel D (2007). All ...
  • Ariannejad H, Nassiri MR, Aslaminejad A, Tahmoorespour M, Valizadeh R, ...
  • Ausubel F, Brent R, Kingstone R )1995(. Current Protocols in ...
  • Benov L, AI-Ibraheem J (2002). Disrupting Escherichia coli: A comparison ...
  • Berlec A, Jevnikar Z, Majhenic AC, Rogelj I, Strukelj B ...
  • Bonas U, Schulte R, Fenselau S, Minsavage GV, Staskawicz BJ,  ...
  • Brunings AM, Gabriel DW (2003). Xanthomonas citri: breaking the surface. ...
  • Büttner D, Nennstiel D, Klüsener B, Bonas U (2002). Functional ...
  • Cervera M, Esteban O, Gil M, Gorris MT, Martínez MC, ...
  • Cornelis GR,Van Gijsegem F (2000). Assembly and function of type ...
  • Duan Y, Castaneda A, Zhao G, Erdos G, Gabriel DW ...
  • Dunger G, Arabolaza AL, Gottig N, Orellano EG, Ottado J ...
  • Ebrahimi Y (2009). Citrus situation in Iran. Ministry of Jihad ...
  • Khodakaramian G, Rahimian H, Mohamadi M,  Alameh A (1999). Phenotypic ...
  • Hueck CJ (1998). Type III protein secretion systems in bacterial ...
  • Li HP, Zhang JB, Shi RP, Huang T, Fischer R, ...
  • Malembic-Maher S, Gall FL, Danet JL, Borne FD, Bové JM, ...
  • Mudgett MB (2005). New insights to the function of phytopathogenic ...
  • Nino-Liu DO, Ronald PC, Bogdanove AJ (2006). Xanthomonas oryzae pathovars: ...
  • Papzan Z, Shahpiri A (2012). Comparison of Reduction Activity of ...
  • Ponciano G, Ishihara H, Tsuyumu S,  Leach JE (2003). Bacterial ...
  • Pruvost O, Goodarzi T, Boyer1K, Soltaninejad H, Escalon A, Alavi ...
  • Rosano GL, Ceccarelli E A (2014). Recombinant protein expression in ...
  • Sadeghi HMM, Rabbani M, Rismani E, Moazen F, Khodabakhsh F, ...
  • Safarnejad MR, Salehi Jouzani GR, Tabatabaie M, Twyman RM, Schillberg ...
  • Safarpur H, Safarnejad MR, Tabatabaei M, Mohsenifar A (2012). Developing ...
  • Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T (1996). Molecular Cloning - ...
  • Schaad NW, Postnikova E, Lacy G, Sechler A, Agarkova I, ...
  • Shahryari F, Shams-Bakhsh M, Safarnejad MR, Safaiee N, Ataie Kachoiee ...
  • Shiotani H, Fujikawa T, Ishihara H, Tsuyumu S, Ozaki K ...
  • Vauterin L, Hoste B, Kersters K, Swings JG (1995). Reclassification ...
  • Yajima W, Verma SS, Shah S, Rahman MH, Liang Y, ...
  • Yang Y, Gabriel DW (1995). Xanthomonas avirulence/pathogenicity gene family encodes ...
  • Zhao G (2001). Phage display screening and expression in plants ...
    • نمایش کامل مراجع