تجزیه و تحلیل اتصالات مولکول های زیستی با استفاده از روش ترموفورز

فرآیند اتصال پروتیینها، DNA و دیگر مولکو لهای زیستی نقش مهمی در تمام زمین ه های علوم زیستی، از فیزیولوژی گرفته تا پزشکی و داروسازی ایفا م یکنند. بنابراین، آنالیز واکنشهای بیومولکولی نه تنها به بینش بنیادی در زیست شناسی سلول منجر می شود بلکه رو شهای درمانی مختلفی برای بیماریها ارایه می دهد. ترموفورز یک تکنیک بیوفیزیکی جدید است که امکان آنالیز کمی واکن شهای بیومولکولی در محلولها در مقیاس میکرولیتر را با دقت بالا فراهم می کند. این روش برمبنای حرکت مولکو لها در شیب دمایی است. این پدیده شدیدا به خصوصیات مختلف مولکول مانند هیدراسیون، اندازه، بار و کانفورماسیون بستگی دارد. این روش م یتواند برای آنالیز هر نوع واکنشی بین پروتیین ها / پپتیدها، DNA و یا کمپلکسهای مولکولی استفاده شود. به منظور القای گرادیان دما در طول آزمایش MST ، لیزر مادون قرمز استفاده می شود. فلویوروفورهایی که به صورت کووالان متصل م یشوند و یا فلویوروفورهای ذاتی، برای تعیین میزان جابه جایی مولکولها در گرادیان دما استفاده می شوند. برخی از مزی تهای استفاده از این روش عبارتند از: سنجش سریع )در عرض 15 دقیقه(، نیاز به حجم واکنشی اندک ) 4 میکرولیتر(، سنجش پروبهای دارای برچسب فلویورسانسی و فاقد برچسب، محدوده دمایی کنترل شده گسترده ) 20 - 45 C ° ( و غیره ... عاوه بر این، MST کاربردهای مختلفی از جمله تعیین استوکیومتری اتصال و نوع آن، تعیین دقیق تمایل مولکو لهای زیستی در واکن شها، تجزیه و تحلیل تاخوردگی پروتیی نها، آنالیز ترمودینامیکی واکن شهای بیومولکولی، آنالیز سینتیک آنزیمها و غیره ... در نتیجه، برای بررسی واکنش مولکو لهای زیستی در محلو لهای مختلف، MST نسبت به دیگر روشهای رایج، مزیتهای زیادی دارد.

کلیدواژه ها:

آنالیز واکنش ، ترموفورز ، سینتیک آنزیم