بررسی وضعیت بیان بیومارکرهای ER و HER2 درنمونه های توموری سرطان سینه با استفاده از روش NASBA-ELISA
- سال انتشار: 1392
- محل انتشار: نهمین کنگره بین المللی سرطان پستان
- کد COI اختصاصی: ICBCMED09_060
- زبان مقاله: فارسی
- تعداد مشاهده: 641
نویسندگان
دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی مولکولی، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران.
استادیار گروه مهندسی ژنتیک، پژوهشکده فناوری زیستی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران
دانشیار گروه ژنتیک پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران ایران
دانشجوی دکتری ژنتیک مولکولی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.
چکیده
در بسیاری از بیماری های بدخیم و انواع سرطانها، ژن هایی که تحت تاثیر سایر ژن ها و مسیرهای سیگنالینگ 4 و یا دیگر دلایل اپی ژنتیک ، دست خوش تغییراتی اعم از تغییر سطح بیان، خاموشی و یا روشن شدن نا به جا و...میگردند تحت عنوان بیومارکر برای تشخیص بیماری و یا ردیابی پاسخ بدن به درمان خاص مورد بررسی قرار میگیرند. به طور معمول برای پیگیری وضعیت این بیومارکرها روشهایی چون PCR-RT ،FISH ,CISH ,PCR Time Real و...مرسوم میباشند که روش های وقت گیر و گران قیمتی هستند، و به تجهیزات و تبحر خاصی نیازمندند. در این پژوهش روش آشکارسازی ایزوترمال based sequence acid Nucleic(NASBA (amplification ،که یک روش تکثیر اسید نوکلییک ایزوترمال است و نیازی به دستگاه ترموسایکلر ندارد و دارای مراحل کمتری نسبت به سایر روشهای تکثیر اسید نوکلییک میباشد استفاده شداین روش با همراهی ELISA به دلیل استفاده ی همزمان از پروب و پرایمر اختصاصی دارای اختصاصیت و حساسیت بسیار بالاتری نسبت به سایر روشهای متداول تکثیر اسید نوکلییک میباشد مواد و روشها RNA کل سلولی از بافت مورد نظر استخراج و با وارد کردن نوکلیوتید UTP-11-digoxigenin به عنوان نوکلیوتید نشاندار شده در مخلوط واکنش NASBA ،با 5 پرایمرهای اختصاصی ER و HER2 مولکول RNA نشاندار تولید شد. سپس محصول نشاندار به یک پ روب بیوتینه که در کف پلیت های استرپتوآویدین قرار گرفته است هیبرید گردید. در ادامه، با واکنش الایزا اشکارسازی نهایی انجام شد نتایج به وسیله ی روش ELISA-NASBA وضعیت بیومارکرهای ER و HER2 بر روی هفت مورد نمونه ی توموری و نرمال خریداری شده از تومور بانک بررسی شد که نتایج با اطلاعات ارایه شده توسط تومور بانک مطابقت داشت. بحث ما در پژوهشکده ی فناوری زیستی دانشگاه مالک اشتر برای اولین بار در دنیا، روش ELISA-NASBA را برای بررسی وضعیت بیان ER و HER2 بیومارکرهای اختصاصی سرطان سینه، با حساسیت بسیار بالا وبا نیاز به حداقل میزان RNAکل سلولی ،پیاده سازی نمودیمکلیدواژه ها
ناسبا،سرطان سینه،بیومارکر،استروژنمقالات مرتبط جدید
اطلاعات بیشتر در مورد COI
COI مخفف عبارت CIVILICA Object Identifier به معنی شناسه سیویلیکا برای اسناد است. COI کدی است که مطابق محل انتشار، به مقالات کنفرانسها و ژورنالهای داخل کشور به هنگام نمایه سازی بر روی پایگاه استنادی سیویلیکا اختصاص می یابد.
کد COI به مفهوم کد ملی اسناد نمایه شده در سیویلیکا است و کدی یکتا و ثابت است و به همین دلیل همواره قابلیت استناد و پیگیری دارد.