تعیین شرایط مناسب کشت در تولید کپسول پنوموکک

سازمان بهداشت جهانی استفاده از واکسنهای کنژوگه پنوموکک را برای محافظت از کودکان در برابر بیماریهای پنوموککی توصیه کرده است. آنتی ژن مورد استفاده در ساخت این واکسنها، کپسول پنوموکک است. پنوموکک سروتیپ 19F سروتیپی مهم در بیماریزایی این باکتری است. بنابراین هدف این مطالعه تعیین شرایط مناسب تولید کپسول پنوموکک سروتیپ 19F است. با توجه به وابستگی تولید محصولات میکروبی به سویه باکتری مورد استفاده و نیز شرایط محیطی کشت، تولید کپسول سروتیپ 19F در سویه های پنوموکک پس از کشت در محیط تغییر یافته Hoeprich در دمای 37°C و pH 7.5 با استفاده از روش stains all بررسی شد. انالیز آماری نتایج مذکور با تست توکی صورت گرفت. مقایسه پروفایل پروتیینی سویه ها با استفاده از SDS-PAGE 10% انجام شد. سویه S. pneumoniae 67H بالاترین میزان تولید کپسول ( 0.656-0.01 mg/ml ) را در میان ایزوله های ایرانی مورد مطالعه داشت. اما میزان کپسول تولیدی سویه 1.6 (1.053 mg/ml) S. pneumoniae SSI 82218 برابر سویه S. pneumoniae 67H بود. نتایج تست توکی موید اختلاف معنی داردر میزان تولید کپسول این دو سویه بود. بنابراین سویه S. pneumoniae SSI 82218 سویه برتر برای تولید کپسول میباشد. پروفایل پروتیینی دو سویه مذکور از نظر شدت باندهای مشاهده شده در محدوده 99-100 kDa در ژل SDS-PAGE متفاوت بودند. محدوده مناسب pH برای تولید کپسول توسط سویه برتر 6.5-7.5 بود. افزایش در دمای کشت سویه برتر تا 37 °C منجر به افزایش در میزان تولید کپسول شد اما کشت در دمای بالاتر منجر به کاهش در تولید کپسول شد. محدوده مناسب همزدگی 0-30 rpm بود و افزایش بیشتر سرعت همزدگی منجر به کاهش قابل توجه در میزان تولید کپسول شد. میزان کپسول تولیدی توسط سویه برتر در این تحقیق بسیار بالاتر از مقادیر گزارش شده توسط محققین دیگر بود بنابراین نتایج ما میتواند در طراحی سیستم مناسب تولید کپسول پنوموکک سروتیپ 19F مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه ها:

استرپتوکوکوس پنومونیای سروتیپ 19F ، کپسول ، واکسن ، سویه ، شرایط محیطی کشت