کلونینگ و بیان ژن اپسیلون کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D سویه واکسینال در E.coli به عنوان میزبان واکسینال نوترکیب

کلستریدیوم پرفرینجنز یک باکتری گرم مثبت بی هوازی اجباری و قادر به تولید اسپور های مقاوم گسترده در محیط است. کلستریدیومپرفرینجنز بر اساس تولید چهار توکسین اصلی آلفا، بتا، اپسیلون و یوتا، به پنج تیپ A تا E طبقه بندی می گردد. هدف مقاله حاضر کلونینگ و بیان ژن توکسین اپسیلون کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ D سویه واکسینال است. DNA ژنومیک استخراج و ژن توکسین اپسیلون با استفاده از DNA Pfu پلی مراز تکثیر داده شد. محصول PCR در کلونینگ وکتور PJET1.2/blunt کلون شد. وکتور نوترکیب pJETε از طریق پرایمر های جهانی تعیین توالی گردید. در گام بعدی ژن توکسین اپسیلون مجددادر یک وکتور بیانی (+)PET22b کلون و به سویه میزبان (E. Coli Rosetta(DE3 ترانسفورم شد. بعداز کلونینگ مجدد ژن etx کلستریدیوم پرفرینجنز در وکتور بیانی، پروتیین نوترکیب در سلول های (E. coli Rosetta (DE3 بیان گردید. نتیجه گرفتیم که سویه E.coli Rosetta برای بیان پروتیین نوترکیب اپسیلون کلستریدیوم پرفرینجنز از وکتور بیانی pET22ε مناسب می باشد.این سلول نو ترکیب می تواند به منظور تحقیقات بیشتر روی گسترش واکسن نوترکیب مورد استفاده واقع شود.کلستریدیوم پرفرینجنز در وکتور بیانی، پروتیین

کلیدواژه ها:

بیان ، ژن توکسین اپسیلون ، سویه واکسینال ، کلستریدیوم پرفرینجنز ، کلونینگ