مطالعه روش الکتروفورز تک بعدی در گیاهان

الکتروفورز بعد اول به دو روش ژل های لوله ای و نوارهای IPG انجام می شود. ژل های بعد اول از نوع لوله ای بدین ترتیب تهیه می شود که 100 میکرولیتر از محلول پروتیینی استخراج شده در الکتروفورز بعد اول توسط ژل های لوله ای و از طریق IEF جداسازی می شود. ژل های لوله ای با اوره هشت مولار، پلی آکریل آمید 3/5%؛ 40NP؛ 2%، آمفولین 2% آمونیوم پرسولفات (10%APS) و TEMED تهیه می شوند. الکتروفورز در بعد اول به صورت سه مرحله ای: 200 ولت به مدت 30 دقیقه، 400 ولت به مدت 16 ساعت و 600 ولت به مدت یک ساعت انجام می گردد. در صورت استفاده از ژل های نواری (IPG) برای انجام بعد اول از Bio Rad)PROTEAN IEF focusing tray) و دستگاه Bio Rad)PROTEAN IEF cell) استفاده می شود. در این روش بعد از انجام بعد اول نوارها به فریز 70 ˚C تا انجام بعد دوم منتقل شوند. برنامه بهینه شده در این مقاله ذکر شده است و برای تهیه ژل های مقدماتی بشرح ارایه شده در متن استفاده می شود.

کلیدواژه ها:

الکتروفورز تک بعدی ، پروتیین ، پروتیومیک ، گیاهان