تولید بخش کربوکسیلیک زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم نوع (BoNT/A-Hc) A با استفاده از روش کشت با تراکم سلولی بالا

سال انتشار: 1387
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 1,439

فایل این مقاله در 10 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

NICEC12_058

تاریخ نمایه سازی: 30 شهریور 1387

چکیده مقاله:

در این تحقیق ابتدا بهترین کلنی از سویه نوترکیب بر اساس سه شاخصه مهم میزان رشد باکتری، بیان پروتئین و پایداری پلاسمید انتخاب شد. به منظور افزایش تولید پروتئین، محیط کشت ساده M9 اصلاح شده به عنوان مبنا انتخاب، متغیرهای شرایط عملیاتی و محیط کشت و تاثیر متقابل متغیرها با استفاده از روش آماری تاگوچی بهینه سازی شد. در شرایط بهینه فلاسک، ۵۲ میلی گرم محصول به ازای یک لیتر محیط کشت حاصل شد. سپس تأثیر متغیرهای OD القا و غلظت IPTG در فرایند ناپیوسته رشد و تولید محصول بررسی شد. نتایج حاصله نشان داد که القا در انتهای فاز لگاریتمی و با غلظت ۱ میلی مولار IPTG برای بیان پروتئین نوترکیب به میزان ۶۲ میلی گرم در لیتر مناسب می باشد. در بخش بعدی تحقق فرایند کشت ناپیوسته خوراک دهی شده انجام شد. نتایج نشان داد که مقدار ٤٨٦ میلی گرم پروتئین نوترکیب BoNT/A-Hc محلول در فضای سیتوپلاسمی به ازاء یک لیتر محیط کشت حاصل می شود. این مقدار 9/3 برابر بیشتر از تولید در مقیاس فلاسک و 7/8 برابر بیشتر از تولید در مرحله کشت ناپیوسته است.

نویسندگان

خیرالله یاری

تهران، دانشگاه امام حسین (ع) ،گروه علوم زیستی - پژوهشگاه ملی مهندسی ژن

سید صفا علی فاطمی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری

محمود تولائی

تهران، دانشگاه امام حسین (ع) ،گروه علوم زیستی

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • یاری، خ.، تولایی م.، فاطمی، _ تولید پروتئین نوترکیب BoNT/A-Hc ...
  • Tavallaie, M., Alexander, Ch., Daniel, G., Yannik, P., Maria, M., ...
  • Siegel, L. "Human immune response to botulism pentavalent (ABCDE) toxoied ...
  • Clayton, M., Clyton, J., Brown, D., and Middlebrook, J."Protective, vaccination ...
  • Byrne, M., Smith, T., Montgomery, V., Smith, L. "Purification, potency, ...
  • Zhou, Y., Singh, B."Cloning, high-level expression, single-step purification, and binding ...
  • Zdanovsky A.G. and Zdanovskaia M.V. "Simple and Efficient Method for ...
  • Mark T.Dertzbaugh "Mapping of protective and cross- reactive domains of ...
  • Tavallaie, M., Salmanian, A.H. and bouzari, S "Cloning of Binding ...
  • V. Babaeipour, S.A. Shojaosadat _ S.M. Robatjazi, R. Khalilzadeh, N. ...
  • Li Li and Bal Ram Singh "High-level expression, purification and ...
  • نمایش کامل مراجع