شرایط استخراج بهینه DNA درگیاه دارویی کرچک با ترکیبات پلی فنولی بالا

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 722

فایل این مقاله در 5 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

AFPICONF02_356

تاریخ نمایه سازی: 1 آذر 1394

چکیده مقاله:

استخراج DNA باکیفیت وکمیت بالا یک نیاز بنیادی درعلوم زیست شناسی سلولی و مولکولی می باشد. استخراج DNA از بافت گیاهی به دلیل وجود ترکیبات پلی ساکارید، پروتئین ها و پلی فنل ها شامل فلاونوئیدها و سایر متابولیت های ثانویه که در استخراجDNA ژنومی دخالت می کنند چالش مهمی است. همچنین از آنجا که این ترکیبات با جداسازی ژنومی و واکنش های پایین دست مانند تجزیه آنزیم محدود کننده و تقویت ژن مداخله می کنند روش های استخراج DNA باید برای به حداقل رساندن این ترکیبات تعیین شوند. این مطالعه بهینه شده روش قابل اطمینان و سریع Cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB) را شرح می دهد که نسبت به روش های دلاپورتا و CTAB معمولی به طور خاص برای استخراج DNA از گیاهان کوچک بهینه سازی شده است. همچنین در این پرتکل فقط ایزوآمیلوالکل و کلروفرم استفاده می شود و از فنول که سمیت بالا دارد استفاده نمی شود. نسبت جذب A260/280 از DNA استخراج شده فاقد هرگونه پلی ساکارید، پلی فنول و تانن های آلوده کننده درمحدوده 1.7 تا 1.8 نشان دهنده سطح بالایی از خلوص DNA استخراجی می باشد.

نویسندگان

محبوبه پرک

دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، گروه کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان، ایران

مجید معصومیان

عضو هیئت علمی سازمان پژوهش های علمی صنعتی ایران،گروه تحقیقات گیاهان دارویی، تهران، ایران

جعفر مسعود سینکی

گروه بیوتکنولوژی کشاورزی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان، ایران

حسین عباسپور

گروه فیزیولوژی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد دامغان، ایران