افزایش پایداری حرارتی لیپاز بومی ELBn12 با جهش زایی هدفمند
سال انتشار: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 598
متن کامل این مقاله منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل مقاله (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- صدور گواهی نمایه سازی
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI08_0229
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
چکیده مقاله:
لیپازهای مقاوم به حرارت کاربردهای صنعتی مهمی دارند.از آنجاییکه آنزیم ها تمامی صفات کاربردی مطلوب را ندارند. مهندسی پروتئین می تواند برای بهبود ویژگی های آنها استفاده شود. در این مطالعه لیپاز ELBn12 که از باکتری بومی Enterobacter sp. Bn12 جداسازی شده، برای جهش زایی منطقی مورد استفاده قرارگرفت. ساختار سوم لیپاز توسط نرم افزار Modeller پیش بینی شد. پلاسمید pET-26(b+) حاوی ژن ELBn12 ، به عنوان الگو استفاده شد وجهش Q177A با روش جهش زایی هدفمند اعمال ومحصول PCR در pET-26(b+) همسانه سازی گردید. Escherichia coli Bl21(DE3)pLysS برای بیان استفاده شد. پس از خالص سازی، فعالیت لیپاز بصورت تیترامتری با سیستم pH-Stat اندازه گیری شد. پایداری حرارتی پس از گرماگذاری لیپاز در 60 Cº در طی یک ساعت بررسی گردید. گلوتامین 177 روی یک لوپ سطحی درمدل پیش بینی شده قرار دارد. آنالیز پایداری حرارتی نشان داد که لیپاز ELBn1251% از فعالیت اولیه خود را پس از یک ساعت در Cº60 حفظ می کنددرحالیکه لیپاز جهش یافته 78% از فعالیت خود را دارا است. اسیدهای آمینه ناپایدار در دمای بالا مانند: آسپاراژین، گلوتامین و متیونین، در لیپازهای مقاوم به حرارت کمتر وجود دارند، زیرا آنها در دماهای بالا اکسیده و یا دآمینه می شوند. نتایج این بررسی هم نشان داد که جهش Q177A پایداری حرارتی لیپاز طبیعی را افزایش می دهد.
کلیدواژه ها:
نویسندگان
پریسا فرخ
دانشگاه تربیت مدرس، دانشکده علوم زیستی، گروه ژنتیک، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
باقر یخچالی
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
علی اصغر کارخانه
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
مراجع و منابع این مقاله:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :