بررسی یکپارچگی DNAدر اسپرم فیل ماهی (Huso huso) پس از انجماد

در این مطالعه از روش میکروالکتروفورتیک کامت برای بررسی یکپارچگی DNAاسپرم فیل ماهی (Huso huso) در پاسخ به فرایند انجماد استفاده گردید. ارزیابی یکپارچگی DNA در این تکنیک بر مبنای اندازهگیری آسیب های منعکس شده بصورت شکست رشته ای در سلول ها تحت شرایط قلیایی میباشد. در این روش، ابتدا سلولها در بستری از ژل آگارز روی لام قرار . گرفت و پس از لیز در بافر در شرایط قلیایی الکتروفورز شدند DNA آسیب دیده، تحت جریان الکتروفورز به سمت آند مهاجرت کرده شکلی شبیه به یک ستاره دنبالهدار را در زیر میکروسکوپ فلوئورسانس ایجاد نمود که تصاویر دیجیتال حاصله توسط نرمافزار مورد آنالیز قرار گرفت. تحرک اسپرم نیز همزمان با روش کامت مورد بررسی قرار گرفت. نتایج به دست آمده نشان میدهد که پروتکل مورد استفاده برای انجماد اسپرم فیل ماهی باعث آسیب قابل توجهی در سطح DNA میگردد. در واقع سطح آسیب DNA در اسپرم یخ گشایی شده بطور معنیداری (P <0.05) نسبت به میزان اندازه گیری شده در اسپرم تازه بالاتر بود. بعلاوه نتایج نشان میدهد که میزان کاهش تحرک ناشی از فرایند انجماد-یخ گشایی با شکست رشته DNAمرتبط است. در نهایت قابلیت روش کامت در نمایش آسیب DNA اسپرم فیل ماهی مورد تأیید قرار میگیرد.

کلیدواژه ها:

آسیب DNA سنجش کامت ، انجماد اسپرم ، فیل ماهی ، (Huso huso)