انتقال ژن اینترفرون گامای انسانی (Hu-IFN-Y) به گیاه گوجه فرنگی ( Lycopersicon Esculentum Mill)

امروزه تقاضای زیادی برای تولید پروتئین های نوترکیب انسانی به منظور مصارف درمانی و تشخیصی وجود دارد. اینترفرون گامای انسانی(Hu-IFN-Y) نیز بعنوان یکی از این پروتئین های ارزشمند، وسیله دفاعی بدن در مقابل ویرو سها می باشد و ارزش درمانی بالایی دارد، از این رو بعنوان دارو برای آلودگی های ویروسی، سرطا نها و بیماری های خودایمن مورد استفاده قرارمی گیرد. در این پژوهش ژنHu-IFN-Y که در ناقل بیانی گیاهیpCAMBIA1304 تحت کنترل پیشبرندهCaMV35Sو خاتمه دهنده NOSهمسانه سازی شده بود، با روش استاندارد انجماد و ذوب به باکتری اگروباکتریوم سویه LBA4404منتقل شده و برای تراریختی گیاه گوجه فرنگی(Cal Jرقم) از طریق ریزنمونه های کوتیلدونی و به روش دیسک برگی مورد استفاده قرار گرفت. به منظور تلقیح در ابتدا ریزنمونه ها به مدت 48 ساعت بر روی محیط پیش-کشت قرار گرفته، سپس مایه زنی با اگروباکتریوم انجام شده و ریزنمونه ها به مدت 48 ساعت در تاریکی و دمای 28Cبر روی محیط هم-کشت قرار گرفتند. در نهایت ریزنمونه های تلقیح شده به محیط کشت باززایی که شامل محیط هم -کشت به همراه آنتی بیوتیک های سفوتاکسیم 250 میلی گرم در لیتر و هیگرومایسین 7/5میلی گرم در لیتر منتقل شدند و در شرایط 16 ساعت نور و 8 ساعت تاریکی در اتاق رشد قرار گرفتند. بعد از باززایی، استخراجDNAژنومی گیاه تراریخت انجام شده و بااستفاده از تکنیکPCR حضور ژن Hu-IFN-Y در گیاه تراریخت تایید گردید.

کلیدواژه ها:

پروتئین نوترکیب ، اینترفرون گاما ، گیاه گوجه فرنگی ، انتقال ژن ، اگروباکتریوم