in planta بااستفاده از روش ( Oriza sativa ) ترانسفورماسیون برنج

در طی سالهای گذشته موفقیتهای زیادی در ترانسفورماسیون ژنتیکی ایجاد شده است. موثرترین روش انتقال ژن که گیاهان می باشد. مهمترین شاخصه این روش عدم استفاده از تکنیکهای in planta مستعد آن هستند استفاده از اگروباکتریوم و روش کشت بافت و تولید کالوس است. در این روش خاص از یک سوزن آلوده با محلول اگروباکتریوم به منظور تلقیح بذور برنج در حال استفاده شد. دو باکتری فوق در طی سه مرحله EHA و 105 LBA جوانه زنی استفاده شد. دو سویه ی باکتری به نامهای 4404 انجام شد. بدین منظور in planta و به مدت سه روز کشت داده شدند و ترانسفورماسیون برنج رقم هاشمی با استفاده از روش مایه کوبی بذور در حال جوانه زنی با سوزن آلوده به اگروباکتریوم انجام و بذور در شرایط مناسب برای رشد قرار داده شدند. به منظور تائید ترانسفورماسیون گیاهان در مرحلهی 4 برگی مورد ارزیابی قرار گرفتند. بدین منظور واکنش زنجیرهای پلیمراز با پرایمر و تست گاس به منظور بررسی تظاهر ژن بتاگلوکورونیداز انجام شد. نمونهها با طرح CaMV35S های رفتی برگشتی از پروموتور آماری کاملاً تصادفی بررسی شدند و اختلاف معنی داری بین دو باکتری فوق در ترانسفورماسیون رقم هاشمی دیده نشد

کلیدواژه ها:

آزمون هیستوشیمیایی گاس ، Agrobacterium tumefaciens ، in planta ، ( Oriza sativa )برنج