طراحی، ساخت و بررسی کارآیی ناقلین بیانی جدید گیاهی با جایگاه همسانهسازی توسعهیافته و واجد توالی His-Tag و آغازگر عمومیM13

سال انتشار: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: فارسی
مشاهده: 599

فایل این مقاله در 8 صفحه با فرمت PDF قابل دریافت می باشد

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این مقاله:

شناسه ملی سند علمی:

CIGS13_1123

تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393

چکیده مقاله:

با توجه به کاستیهای برخی ناقلین دوتایی مرسوم، ناقلینی مبتنی بر ناقلpBI121و ناقلpSA101-واجد نشانگر مقاومت به گلایفوسیت به جای نشانگر انتخابی نئومایسین فسفوترانسفراز IIپلاسمید pBI121-که دارای تعداد بسیار بیشتری جایگاه شناسایی آنزیم های برشی مختلف می باشند، طراحی و ساخته شدند. توالیHis-Tagهشت اسید آمینهای برای خالص سازی پروتئین نوترکیب و توالی موردشناسایی آغازگر عمومیM13 به عنوان آغازگر معکوس توالی یابی، در انتهایMCSجدید این ناقلین طراحی شد. صحت ساخت ناقلین باPCRالگوی هضم آنزیمی و تعیین توالی آنها تایید شد. برای بررسی کارآیی ناقلین، ژن گزارشگرβ-galactosidaseدر ناقلین جدید همسانهسازی شده و سازههای حاصل به سویهLBA4404آگروباکتریوم Agrobacterium tumefaciens)منتقل و به واسطه آن انتقال این سازهها به رقم سامسون گیاه توتونNicotiana tabacum var. Samsun)انجام شد. پس از انجام مراحل باززایی، انتقال ناحیهT-DNA این ناقلین به گیاهچههای توتون بررسی و تایید شد. سنجش فعالیتGUSدر گیاهان تراریخت حاکی از بیان موثر ژن گزارشگرGUSوکارآیی ناقل میباشد. ناقلین جدید ثبت اختراع شده اند.

کلیدواژه ها:

ناقل بیانی گیاهی ، انتقال ژن به واسطه آگروباکتریوم ، سازه ، پلاسمید

نویسندگان

کسری اصفهانی

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، بلوار پژوهش، کیلومتر ۱۷ اتوبان تهران کرج، ایران

علی هاتف سلمانیان

پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، بلوار پژوهش، کیلومتر ۱۷ اتوبان تهران کرج، ایران

مراجع و منابع این مقاله:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این مقاله را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود مقاله لینک شده اند :
  • Akbarzadeh, A., F. Kordbacheh, et al. (2010). "A binary vector ...
  • Chen, P. Y., C. K. Wang, et al. (2003). "Complete ...
  • Curtis, M. D. and U. Grossniklaus (2003). "A Gateway Cloning ...
  • De Amicis, F., T. Patti, et al. (2007). "Improvement of ...
  • Gallois P. and Marinho P. (1996) Leaf Disk Transformation Using ...
  • Hajian, B., K. Piri, et al. (2011). _ _ Agrobac ...
  • Hellens, R., P. Mullineaux, et al. (2000). "A guide to ...
  • Horsch R, Fry, J.E., et al. (1985) A simple and ...
  • Jefferson, R. A., T. A. Kavanagh, et al. (1987). "GUS ...
  • Karimi, M., D. Inze, et al. (2002). "GATEWAY C vectors ...
  • Komori, T., T. Imayama, et al. (2007). "Current status of ...
  • Lee, L. Y. and S. B. Gelvin (2008). "T-DNA binary ...
  • Lin, C. Y., H. M. Ku, et al. (2011). "Construction ...
  • Litcke H, et al. (1987) Selection of AUG initiation codons ...
  • Sambrook and Russell DW (2001) Molecular cloning. Cold Spring Harbor, ...
  • Sripriya, R., M. Sangeetha, et al. (2011). "Improved Agrob ac ...
  • نمایش کامل مراجع