تشخیص لژیونلا پنوموفیلا در آبهای راکد تهران به روش تکثیر هم دما به واسطه LAMP حلقه

لژیونلا پنوموفیلا از عوامل مهم پنومونی در انسان بوده که از طریق اب الوده منتقل می شود. این باکتری از متداولترین ارگانیسم های آبی است که باعث بیماری لژیونرشده که تا 15 % می تواند کشنده باشد.هدف از این مطالعه تشخیص سریع لژیونلا پنوموفیلا در آبهای راکدمناطق تهران می باشدمواد و روشها:در این مطالعه، 60 نمونه از آبهای راکد تهران جمع آوری وDNAباکتری به روش ساده جوشاندن استخراج گردید. پنج پرایمر اختصاصیLAMPبه وسیله نرم افزارPrimer Explorer ver:4 و بصورتOnlineدر سایتEikenبرای ژن MIP لژیونلا پنوموفیلا طراحی گردید. تست حساسیت و ویژگی برایLAMPانجام و سپس جهت نمونه ها بهینه سازی گردید. به منظور ارزیابی نتایج + و – از سایبر گرین استفاده گردید.نتایج: تستLAMPبا استفاده ازقطعه بزرگ انزیمBsm DNA polودر 61 دمای درجه سانتیگراد وبه مدت 60 دقیقه اپتیمایزگردید حساسیت تستLAMPتا حد1CFUتاییدو با هیچDNAتست شده واکنش مثبتی مشاهده نشده. از 60 نمونه مورد ازمون در 27نمونه حضور لژیونلا پنوموفیلا مثبت گردید نتیجه:تکنیکLAMPیک روش ساده ، سریع و حساس برای تشخیص لژیونلا پنوموفیلا می باشد و در عین حال این تکنیک نیاز بهتجهیزات گران قیمت ندارد

کلیدواژه ها:

لژیونلا پنوموفیلا ، تشخیص ، آبهای راکد ، LAMP