تشخیص مولکولی، توالی یابی و آنالیز فیلوژنتیکی انگل های لیشمانیا در دو کانون لیشمانیوز جلدی ایران

لیشمانیوز جلدی به عنوا ن یکی از بیماریهای گرمسیری پیچیده در دنیا و ایران، توسط انگل های لیشمانیا ایجاد می شود. ناقل بیماری پشه خاکی ها و مخزن بیماری موش های صحرایی می باشند. استفاده از ژنITS-rDNAو آنالیزهای فیلوژنتیکی برای تشخیص قطعی گونه ها، سویه ها و یا هاپلوتایپ های مختلف لیشمانیا مورد استفاده قرار گرفت. نمونه های لیشمانیایی از بیماران مشکوک در استان های گلستان و خوزستان تهیه گردید. اسلایدهای رنگ آمیزی شده تحت میکروسکوپ نوری ارزیابی شدندDNAانگل استخراج شد و ژن ITS-rDNAتوسطnested PCRتکثیر گردید. برای شناسایی انگل های لیشمانی،ا روشRFLPبکار برده شد و محصولاتPCRباآنزیم محدودالاثرBsuRIمورد برش قرار گرفت. محصولاتPCRبه طور مستقیم توالی یابی شدند نتایج این توالی ها با توالی های لیشمانیایی ثبت شده در بانک ژنی با استفاده از نرم افزارهای 4.4MEGA و 5.05 Sequencher مرتب شدند. لیشمانیا میج ، ر تروپیکا و تورانیکا از بیماران مشکوک در این دو کانون، با استفاده ازRFLPتوالی یابی و آنالیز فیلوژنتیکی، به طور قطعی تشخیص داده شدندهاپلوتایپ های متفاوت از لیشمانیا میجر و تروپیکا یافت شد، اما لیشمانیا تورانیکا با تراکم کمتر و تنها یک هاپلوتایپ در استان گلستانیافت شد. لیشمانیا تروپیکا منحصراً در استان خوزستان پیدا گردید و لیشمانیا میجر در هر دو استان با عفونت های بالا، آشکار شد. تشخیص مولکولی، توالی یابی و آنالیزهای فیلوژنتیکی انگل های لیشمانیا در این مطالعه با قابلیت شناسایی دقیق گونه های لیشمانی،ا هاپلوتایپ های جدید و ارتباط آنها با دیگر گونه های نادر، مورد استفاده قرار گرفت.

کلیدواژه ها:

لیشمانیا ترونیک ، ا لیشمانیا تروپیکا ، PCR-RFLP ، ITS-rDNAو آنالیز فیلوژنتیکی