شناسایی مولکولی گونههای قارچی موجود در دانههای انار انبارشده

مطالعه حاضر جهت شناسایی مولکولی برخی آلودگیهای قارچی در دانه انار انبارشده صورت پذیرفت. پس از آمادهسازی نمونهها،تیمارها در دمای 30±1 درجه سلسیوس انکوبه شدند. پس از کشت اولیه و شناخت مرفولوژیکی توسط استرئومیکروسکوپ پرگنههای مشکوک به آسپرژیلوس با روش تک اسپور جداسازی و نمونهها در محیط کشت اختصاصیSDAکه توسط آنتی بیوتیک استرپتومایسین جهت جلوگیری از آلودگی توسط باکتریها و مخمرها تزریق شده و به مدت 14 روز انکوبه شدند. پس از مشاهده عینی رشد قارچها در پلیتها و تشخیص مورفولوژیکی قارچ آسپرژیلوس، از روش CTABبافر جهت استخراجDNA قارچ مذکور استفاده گردید. با استفاده ازDNA استخراج شده در شناسایی مولکولی توانستیم با پرایمرهایی که مختص جایگاه تولید آفلاتوکسین هستند گونه تولید آفلاتوکسین را شناسایی کنیم. در بررسی نتایج حاضر گونههای مختلفی از نمونههای قارچی در تولید آفلاتوکسین مؤثر هستند. دادههای مولکولی بدست آمده در روی نمونهA با نتایج کنونی مطابقت دارد. گونهای از آسپرژیلوس نیجر در محصولPCRبه هیچیک از پرایمرها باندی مشاهده نشد. گونهای از آسپرژیلوس فلاووس با 2 پرایمر به نامهای Apa- و 2 Ver -1در محصولPCRباند تشکیل داده است. در نتیجه دو گونه آسپرژیلوس نیجر وآسپرژیلوس فلاووس از بین قارچهای انباری رشد کرده بر روی دانههای انار جداسازی و شناسایی گردید

کلیدواژه ها:

شناسایی مولکولی ، آلودگیهای قارچی ، دانههای انار انبارشده ، استخراجPCR ، DNA