مطالعه بیان ژن Oct4 در سلول هایHEK293tبا استفاده از سازه گزارشگرpOct4-EGFP

یکی از فاکتور های اصلی Oct4 دخیل در ویژگی پرتوانی و خودنوزایی سلول های بنیادی جنیی می باشد. اخیرا در مطالعاتی ادعا شده است کهOct4در سلول هایی همچون سلول های توموری سوماتیک و سلول های بنیادی بالغ نیز بیان می شود. سلول هایHEK293t یکی از رده های سلولی سرطانی می باشد که به نظر می رسد برخی از مارکرهای پرتوانی از جملهOct4را بیان کند. هدف از این تحقیق بررسی بیان فاکتور رونویسیOct4در سلول های رده سرطانیHEK293tبا استفاده از سازه گزارشگر pOct4-EGFPمی باشد. این سازه حاوی پروموترOct4بوده و در سلول هایی که ژنOct4آن ها فعال می باشد، ژنEGFPرا بیان می کند.مواد و روش ها: با استفاده از روش کلسیم فسفات، پلاسمید حاوی ژنEGFPتحت کنترل پروموترOct4به درون سلولHEK293t ترانسفکت شد و پس از گذشت 48 ساعت بیان پروتئینEGFPدر سلول ها با استفاده میکروسکوپ فلورسنس بررسی شد نتایج: ترانسفکت کردن با سازه ژنpOct4-EGFPبیان ژن پرتوانیOct4 را در رده سلولیHEK293tنشان داد. حضور رونوشت Oct4نیز باRT-PCRتایید شد. این مشاهدات نشان می دهد که سلول های ردهHEK293tممکن است سایر نشانگرهای سلول های بنیادی را نیز بیان کنند که البته تایید آن نیازمند مطالعات بیشتر است.

کلیدواژه ها:

سازه ژنیpOct4-EGFP ، پرتوانی ، Oct4 ، سلولHEK293t